A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
1Animal and Veterinary Research Centre (CECAV), Associate Laboratory for Animal and Veterinary Science-AL4AnimalS,University of Trás-os-Montes and Alto Douro (UTAD), 2Pathology Laboratory,UEISPSA, National Institute for Agricultural and Veterinary Research (INIAV), Oeiras, 3Pathology Laboratory,UEISPSA, National Institute for Agricultural and Veterinary Research (INIAV), Vairão
Chapters
- 00:04Introduction
- 00:48Deparaffinization and Rehydration
- 01:39Epitope Retrieval
- 02:31Inactivation of Endogenous Peroxidase and Immunodetection
- 04:59Results: Epitope Demasking for Proper PrP Immunolabeling and Minimizing Non-Specific Background Staining
- 06:00Conclusion
תיוג חיסוני של חלבון פריון חריג באמצעות פרוטוקולים אימונוהיסטוכימיים דורש דגימה ספציפית ומתודולוגיות להכנת נוגדנים נגד PrP. הפרוטוקול הנוכחי מתאר את השלבים העיקריים בהסרת אפיטופים כדי להבטיח תיוג חיסוני תקין של PrP ולמזער כתמי רקע לא ספציפיים. כמו כן, גישה זו לוקחת בחשבון אמצעי בטיחות ביולוגית בעת ביצוע מחקרים אימונוהיסטוכימיים עם רקמות נגועות פריון.
