A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Chapters
- 00:04Introduction
- 01:01Genome‐Wide Substitution Mutagenesis of JFH1 Using Error‐Prone PCR
- 02:46Estimation of the Proportion of Mutations in ep‐PCR Products (Mutant Libraries)
- 06:08Viral RNA Transfection of the Huh7.5 Cell Line
- 07:57Quantification of Virus Titers
- 11:59Drug‐Resistant Viral Variant Selection
- 13:33Results: Integration of ep‐PCR and Virus Reverse Genetics to Generate HCV Mutants
- 15:17Conclusion
Protokol, hataya açık PCR ve ters genetik kullanarak tam uzunlukta mutant RNA sentezini birleştirerek hepatit C virüsü genomunda kontrol edilebilir genetik çeşitliliği tanıtmak için bir yöntemi açıklar. Yöntem, fenotip seçimi için bir model sağlar ve 10 kb uzunluğunda pozitif anlamlı RNA virüs genomları için kullanılabilir.
