Journal
/
/
גנטיקה הפוכה כדי להנדס וריאנטים של נגיף RNA בעל חוש חיובי
JoVE Journal
Genetics
Author Produced
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Genetics
Reverse Genetics to Engineer Positive-Sense RNA Virus Variants
DOI:

15:49 min

June 09, 2022

, , ,

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 01:01Genome‐Wide Substitution Mutagenesis of JFH1 Using Error‐Prone PCR
  • 02:46Estimation of the Proportion of Mutations in ep‐PCR Products (Mutant Libraries)
  • 06:08Viral RNA Transfection of the Huh7.5 Cell Line
  • 07:57Quantification of Virus Titers
  • 11:59Drug‐Resistant Viral Variant Selection
  • 13:33Results: Integration of ep‐PCR and Virus Reverse Genetics to Generate HCV Mutants
  • 15:17Conclusion

Summary

Automatic Translation

הפרוטוקול מתאר שיטה להחדרת מגוון גנטי נשלט בגנום נגיף הפטיטיס C על ידי שילוב סינתזת RNA מוטנטית באורך מלא באמצעות PCR נוטה לשגיאות וגנטיקה הפוכה. השיטה מספקת מודל לבחירת פנוטיפ וניתן להשתמש בה עבור גנומים ארוכים של 10 קילובייט של נגיף RNA בעל חוש חיובי.

Related Videos

Read Article