A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Chapters
- 00:04Introduction
- 01:01Genome‐Wide Substitution Mutagenesis of JFH1 Using Error‐Prone PCR
- 02:46Estimation of the Proportion of Mutations in ep‐PCR Products (Mutant Libraries)
- 06:08Viral RNA Transfection of the Huh7.5 Cell Line
- 07:57Quantification of Virus Titers
- 11:59Drug‐Resistant Viral Variant Selection
- 13:33Results: Integration of ep‐PCR and Virus Reverse Genetics to Generate HCV Mutants
- 15:17Conclusion
Protokollen beskriver en metode for å introdusere kontrollerbart genetisk mangfold i hepatitt C-virusgenomet ved å kombinere full lengde mutant RNA-syntese ved hjelp av feilutsatt PCR og omvendt genetikk. Metoden gir en modell for fenotypeseleksjon og kan brukes til 10 kb lange positive sense RNA-virusgenomer.
