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Visualisation et quantification de la signalisation TGFβ/BMP/SMAD dans différentes conditions de contrainte de cisaillement du fluide à l’aide du test de proximité-ligature-assay
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Visualization and Quantification of TGFβ/BMP/SMAD Signaling under Different Fluid Shear Stress Conditions using Proximity-Ligation-Assay
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Visualisation et quantification de la signalisation TGFβ/BMP/SMAD dans différentes conditions de contrainte de cisaillement du fluide à l’aide du test de proximité-ligature-assay

DOI:
10.3791/62608-v

•

11:38 min

•

September 14, 2021

•

, ,
1Institute for Chemistry and Biochemistry,Freie Universität Berlin, 2International Max-Planck Research School for Biology and Computation

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 00:40Cell Culture and Fluid Shear Stress Exposure
  • 02:55Fixation
  • 04:58Blocking and Incubation with Primary Antibody
  • 06:28Incubation with PLA Probe and Ligation
  • 07:34Amplification and Mounting
  • 09:14Results: Effect of Shear Stress on the SMAD Protein Interactions
  • 11:02Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Ici, nous établissons un protocole pour visualiser et analyser simultanément plusieurs complexes SMAD en utilisant le test de ligature de proximité (PLA) dans les cellules endothéliales exposées à des conditions pathologiques et physiologiques de stress de cisaillement des fluides.

Tags

TGF-β/BMP/SMAD SignalingProximity Ligation AssayFluid Shear StressMicrofluidic Flow ChannelsHUVEC CellsTranscription Factor ComplexesVascular Biology

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