Journal
/
Biochemistry
/
Visualisering og kvantificering af TGFβ/BMP/SMAD Signalering under forskellige væskeforskydningsstress ved hjælp af proximity-ligation-assay
JoVE Journal
Biochemistry
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Biochemistry
Visualization and Quantification of TGFβ/BMP/SMAD Signaling under Different Fluid Shear Stress Conditions using Proximity-Ligation-Assay

Visualisering og kvantificering af TGFβ/BMP/SMAD Signalering under forskellige væskeforskydningsstress ved hjælp af proximity-ligation-assay

DOI:
10.3791/62608-v

•

11:38 min

•

September 14, 2021

•

, ,
1Institute for Chemistry and Biochemistry,Freie Universität Berlin, 2International Max-Planck Research School for Biology and Computation

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 00:40Cell Culture and Fluid Shear Stress Exposure
  • 02:55Fixation
  • 04:58Blocking and Incubation with Primary Antibody
  • 06:28Incubation with PLA Probe and Ligation
  • 07:34Amplification and Mounting
  • 09:14Results: Effect of Shear Stress on the SMAD Protein Interactions
  • 11:02Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Her etablerer vi en protokol til samtidig at visualisere og analysere flere SMAD-komplekser ved hjælp af nærhed ligation assay (PLA) i endotelceller udsat for patologiske og fysiologiske væskeforskydningsstress betingelser.

Tags

TGF-β/BMP/SMAD SignalingProximity Ligation AssayFluid Shear StressMicrofluidic Flow ChannelsHUVEC CellsTranscription Factor ComplexesVascular Biology

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

Kvantificering af Bakteriel Histidin kinase Autophosphorylering Ved hjælp af en Nitrocellulose-bindingsassay

Visualisering af protein-protein interaktion i nukleare og Cytoplasmiske Brøker af Co-immunopræcipitation og<em> In Situ</em> Proximity ligeringsassayet

Hydrolyseprodukter af en Ni-Schiff-Base Complex Brug af betingelser egnet til Bevarelse af syrelabile Protecting Groups

Påvisning og visualisering af DNA-skader-inducerede proteinkomplekser i suspensionscellekulturer ved anvendelse af Proximity Ligation Assay

Påvisning af Heterodimerization af Protein isoformer ved hjælp af en in Situ nærhed ligatur Assay

Kvantificering af protein interaktions netværk dynamik ved hjælp af Multiplexed Co-Immunopræcipitation

Medium forberedelse til dyrkning af mikroorganismer under strengt anaerobe/anoxiske forhold

Kvantificering af coenzym A i celler og væv

Visualisering af østrogenreceptorer i koloner af mus med TNBS-induceret Crohns sygdom ved hjælp af immunofluorescens

Fosforproteomic strategi for profilering osmotisk stress signalering i Arabidopsis

Read Article