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PCR de gotícula digital para detectar mutações indelés em populações de mosquitos anofelinos geneticamente modificados
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Digital-Droplet PCR to Detect Indels Mutations in Genetically Modified Anopheline Mosquito Populations

PCR de gotícula digital para detectar mutações indelés em populações de mosquitos anofelinos geneticamente modificados

português

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05:51 min

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June 28, 2021

DOI:

10.3791/62607-v

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10.3791/62607-v

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June 28, 2021

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1Department of Microbiology & Molecular Genetics,University of California, Irvine, 2Department of Molecular Biology & Biochemistry,University of California, Irvine

Summary

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Este protocolo fornece os passos desde a extração de DNA até a configuração experimental para PCR de gotícula digital (ddPCR), incluindo análise para identificação e quantificação de eventos não homólogos de junção final (NHEJ) em locais-alvo após o decote Cas9 induzido pelo GRNA e reparação de DNA. Outros usos deste método incluem aplicações como detecção de polimorfismo e verificação de variantes de edição de genes.

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Digital Droplet PCRDdPCRNHEJ AnalysisIndel MutationsGene-edited MosquitoGenetic VariationHigh ThroughputFast TurnaroundField AnalysisGenetically Modified Organisms

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Carballar-Lejarazú, R., Pham, T. B., Kelsey, A., Tushar, T., James, A. A. Digital-Droplet PCR to Detect Indels Mutations in Genetically Modified Anopheline Mosquito Populations. J. Vis. Exp. (172), e62607, doi:10.3791/62607 (2021).

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