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Digital-Droplet PCR per rilevare mutazioni di Indels in popolazioni di zanzare anofeline geneticamente modificate
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Digital-Droplet PCR to Detect Indels Mutations in Genetically Modified Anopheline Mosquito Populations
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Digital-Droplet PCR per rilevare mutazioni di Indels in popolazioni di zanzare anofeline geneticamente modificate

italiano

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05:51 min

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June 28, 2021

DOI:

10.3791/62607-v

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10.3791/62607-v

•

05:51 min
June 28, 2021

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1Department of Microbiology & Molecular Genetics,University of California, Irvine, 2Department of Molecular Biology & Biochemistry,University of California, Irvine

Summary

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Questo protocollo fornisce le fasi dall'estrazione del DNA al set-up sperimentale per la PCR a goccia digitale (ddPCR), compresa l'analisi per l'identificazione e la quantificazione di eventi di giunzione finale non omologa (NHEJ) nei siti bersaglio a seguito di scissione Cas9 indotta da gRNA e riparazione del DNA. Altri usi di questo metodo includono applicazioni come il rilevamento del polimorfismo e la verifica delle varianti di modifica genetica.

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Digital Droplet PCRDdPCRNHEJ AnalysisIndel MutationsGene-edited MosquitoGenetic VariationHigh ThroughputFast TurnaroundField AnalysisGenetically Modified Organisms

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Carballar-Lejarazú, R., Pham, T. B., Kelsey, A., Tushar, T., James, A. A. Digital-Droplet PCR to Detect Indels Mutations in Genetically Modified Anopheline Mosquito Populations. J. Vis. Exp. (172), e62607, doi:10.3791/62607 (2021).

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