Journal
/
Genetics
/
Knockdown estável de genes codificando proteínas matrizes extracelulares na linha célula do mioblasto C2C12 usando pequeno-hairpin (sh)RNA
JoVE Journal
Genetics
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Genetics
Stable Knockdown of Genes Encoding Extracellular Matrix Proteins in the C2C12 Myoblast Cell Line Using Small-Hairpin (sh)RNA

Knockdown estável de genes codificando proteínas matrizes extracelulares na linha célula do mioblasto C2C12 usando pequeno-hairpin (sh)RNA

DOI:
10.3791/60824-v

•

12:19 min

•

February 12, 2020

•

, ,
1Orthopaedic Research Laboratories, Leni & Peter W. May Department of Orthopaedics,Icahn School of Medicine at Mount Sinai

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:55C2C12 Transfection
  • 02:35Transfected C2C12 Selection
  • 03:15C2C12 Differentiation
  • 03:59Phenotypic Analysis
  • 06:10Western Blot Analysis Sample Preparation
  • 09:37Results: Representative C2C12 Selection, Differentiation, and Knockdown Validation
  • 11:19Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Fornecemos um protocolo para derrubar genes que codificam proteínas de matriz extracelular (ECM) em mioblastos C2C12 usando rNA de pino pequeno (sh). Visando o ADAMTSL2 como exemplo, descrevemos os métodos para a validação da eficiência de knockdown no nível mRNA, proteína e celular durante o mioblasto C2C12 à diferenciação do miotubo.

Tags

C2C12 MyoblastShRNAGene KnockdownExtracellular Matrix ProteinsStable Cell LineTransfectionPuromycin SelectionCell CultureMyotube Formation

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

Preparação de rAAV9 para superexpressão ou Knockdown Genes em mouse Corações

Conjugadas acasalamento Os ensaios para a análise específica da sequência de proteínas de transferência envolvidos na conjugação bacteriana

Peptídeo derivado Método para Transporte genes e proteínas Através Celular e Barreiras organelares em plantas

Criação e Double-stranded mediada por RNA silenciamento de genes na Esconder Beetle,<em> Dermestes maculatus</em

Detecção de Copy Number Alterações Usando Sequencing única célula

Visadas<em> In Situ</em> mutagénese de histona Genes em brotamento Yeast

qKAT: quantitativa coeficiente digitação de assassino-célula Genes de receptores de imunoglobulina-como

Usando em forma de Vitro e na célula para investigar a pequena molécula induzida por alterações estruturais Pre-mRNA

Determinação da taxa de fertilização do ovo de Bemisia tabaci usando uma técnica citogenética

Projetando experimentos de crescimento de células contínuas, de alta produtividade e automatizados usando o eVOLVER

Read Article