Journal
/
Genetics
/
Stable Knockdown of Genes Encoding Extracellular Matrix Proteins in the C2C12 Myoblast Cell Line Using Small-Hairpin (sh)RNA
JoVE Journal
Genetics
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Genetics
Stable Knockdown of Genes Encoding Extracellular Matrix Proteins in the C2C12 Myoblast Cell Line Using Small-Hairpin (sh)RNA
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Stable Knockdown of Genes Encoding Extracellular Matrix Proteins in the C2C12 Myoblast Cell Line Using Small-Hairpin (sh)RNA

DOI:
10.3791/60824-v

•

12:19 min

•

February 12, 2020

•

, ,
1Orthopaedic Research Laboratories, Leni & Peter W. May Department of Orthopaedics,Icahn School of Medicine at Mount Sinai

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:55C2C12 Transfection
  • 02:35Transfected C2C12 Selection
  • 03:15C2C12 Differentiation
  • 03:59Phenotypic Analysis
  • 06:10Western Blot Analysis Sample Preparation
  • 09:37Results: Representative C2C12 Selection, Differentiation, and Knockdown Validation
  • 11:19Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

We bieden een protocol om genen die extracellulaire matrix (ECM) eiwitten coderen in C2C12 myoblasten neer te halen met behulp van small-hairpin (sh) RNA. Gericht op ADAMTSL2 als voorbeeld, beschrijven we de methoden voor de validatie van de knockdown-efficiëntie op het mRNA-, eiwit- en cellulair niveau tijdens C2C12 myoblast tot myotubedifferentiatie.

Tags

C2C12 MyoblastShRNAGene KnockdownExtracellular Matrix ProteinsStable Cell LineTransfectionPuromycin SelectionCell CultureMyotube Formation

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

Voorbereiding van de rAAV9 tot overexpressie of Knockdown Genes in Mouse Hearts

Conjugative Mating Testen voor sequentie-specifieke analyse van Transfer eiwitten die betrokken zijn in bacterieconjugatie

-Peptide afgeleide methode om genen en eiwitten Across Cellulaire en organellen Barriers in Planten Transport

Grootbrengen en Double-stranded RNA-gemedieerde gen knock-down in het verbergen Kever,<em> Dermestes maculatus</em

Detectie van Copy Number Wijzigingen met behulp van Single Cell Sequencing

gerichte<em> In Situ</em> Mutagenese van histon genen in gist

qKAT: kwantitatieve Semi-automated te typen van Killer-cel immunoglobuline-achtig Receptor genen

Met behulp van In Vitro en In cel vorm te onderzoeken klein molecuul veroorzaakte structurele veranderingen van de Pre-mRNA

Bepaling van het tarief van de bevruchting ei van Bemisia tabaci met behulp van een cytogenetische techniek

Het ontwerpen van geautomatiseerde, high-throughput, continue celgroei experimenten met behulp van evolver

Read Article