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小ヘアピン(sh)RNAを用いたC2C12筋芽細胞細胞株系の細胞外マトリックスタンパク質をコードする遺伝子の安定ノックダウン
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Stable Knockdown of Genes Encoding Extracellular Matrix Proteins in the C2C12 Myoblast Cell Line Using Small-Hairpin (sh)RNA
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小ヘアピン(sh)RNAを用いたC2C12筋芽細胞細胞株系の細胞外マトリックスタンパク質をコードする遺伝子の安定ノックダウン

DOI:
10.3791/60824-v

•

12:19 min

•

February 12, 2020

•

, ,
1Orthopaedic Research Laboratories, Leni & Peter W. May Department of Orthopaedics,Icahn School of Medicine at Mount Sinai

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:55C2C12 Transfection
  • 02:35Transfected C2C12 Selection
  • 03:15C2C12 Differentiation
  • 03:59Phenotypic Analysis
  • 06:10Western Blot Analysis Sample Preparation
  • 09:37Results: Representative C2C12 Selection, Differentiation, and Knockdown Validation
  • 11:19Conclusion

Summary

Automatic Translation

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小さなヘアピン(sh)RNAを用いてC2C12筋芽細胞(ECM)タンパク質をコードする遺伝子を安定的にノックダウンするプロトコルを提供します。ADAMTSL2を例に、ミオチューブ分化に対するC2C12筋芽細胞間におけるmRNA、タンパク質、および細胞レベルのノックダウン効率の検証方法について説明します。

Tags

C2C12 MyoblastShRNAGene KnockdownExtracellular Matrix ProteinsStable Cell LineTransfectionPuromycin SelectionCell CultureMyotube Formation

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