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使用有条件Cas9稳定评估基因功能的新工具包
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JoVE Journal Genetics
A New Toolkit for Evaluating Gene Functions using Conditional Cas9 Stabilization
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使用有条件Cas9稳定评估基因功能的新工具包

DOI:
10.3791/60685-v

•

08:20 min

•

September 02, 2021

•

,
1Cold Spring Harbor Laboratory, 2Faculty of Pharmacy,University of Ljubljana

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 01:00Lentiviral Preparation
  • 02:47Determining Virus Titer and Transduction Efficacy with Flow Cytometry
  • 04:27Lentiviral Transduction of Target Cells and Conditional Induction of Cas9 Mediated Gene Editing
  • 06:06Results: Analysis of Reversibility and Rapidity of Destabilized DD-Cas9 Protein
  • 07:24Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

在这里，我们描述了一个基因组编辑工具，基于时间和条件稳定聚类定期间歇性短腹膜重复（CRISPR-）相关蛋白质9（Cas9）下的小分子，盾牌-1。该方法可用于培养细胞和动物模型。

Tags

Keywords: CRISPR-Cas9Gene EditingConditional Cas9 StabilizationShield-1Essential GenesTumor Survival GenesDD-Cas9In VivoIn VitroBlood-brain BarrierHEK293T CellsTransfectionVirus SupernatantVirus Titer

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