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Une nouvelle boîte à outils pour évaluer les fonctions des gènes à l’aide de la stabilisation cas9 conditionnelle
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JoVE Journal Genetics
A New Toolkit for Evaluating Gene Functions using Conditional Cas9 Stabilization
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Une nouvelle boîte à outils pour évaluer les fonctions des gènes à l’aide de la stabilisation cas9 conditionnelle

DOI:
10.3791/60685-v

•

08:20 min

•

September 02, 2021

•

,
1Cold Spring Harbor Laboratory, 2Faculty of Pharmacy,University of Ljubljana

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 01:00Lentiviral Preparation
  • 02:47Determining Virus Titer and Transduction Efficacy with Flow Cytometry
  • 04:27Lentiviral Transduction of Target Cells and Conditional Induction of Cas9 Mediated Gene Editing
  • 06:06Results: Analysis of Reversibility and Rapidity of Destabilized DD-Cas9 Protein
  • 07:24Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Nous décrivons ici un outil d’édition du génome basé sur la stabilisation temporelle et conditionnelle de la protéine 9 (Cas9) associée à la répétition palindromique courte (CRISPR-) groupée régulièrement espacée sous la petite molécule Shield-1. La méthode peut être utilisée pour des cellules cultivées et des modèles animaux.

Tags

Keywords: CRISPR-Cas9Gene EditingConditional Cas9 StabilizationShield-1Essential GenesTumor Survival GenesDD-Cas9In VivoIn VitroBlood-brain BarrierHEK293T CellsTransfectionVirus SupernatantVirus Titer

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