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Ein neues Toolkit zur Bewertung von Genfunktionen mit bedingter Cas9-Stabilisierung
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JoVE Journal Genetics
A New Toolkit for Evaluating Gene Functions using Conditional Cas9 Stabilization
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Ein neues Toolkit zur Bewertung von Genfunktionen mit bedingter Cas9-Stabilisierung

DOI:
10.3791/60685-v

•

08:20 min

•

September 02, 2021

•

,
1Cold Spring Harbor Laboratory, 2Faculty of Pharmacy,University of Ljubljana

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 01:00Lentiviral Preparation
  • 02:47Determining Virus Titer and Transduction Efficacy with Flow Cytometry
  • 04:27Lentiviral Transduction of Target Cells and Conditional Induction of Cas9 Mediated Gene Editing
  • 06:06Results: Analysis of Reversibility and Rapidity of Destabilized DD-Cas9 Protein
  • 07:24Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Hier beschreiben wir ein Genom-Editing-Tool, das auf der zeitlichen und bedingten Stabilisierung des geclusterten, regelmäßig interspaced short palindromic repeat- (CRISPR-) assoziierten Proteins 9 (Cas9) unter dem kleinen Molekül Shield-1 basiert. Die Methode kann für kultivierte Zellen und Tiermodelle verwendet werden.

Tags

CRISPR-Cas9Gene EditingConditional Cas9 StabilizationShield-1Essential GenesTumor Survival GenesDD-Cas9In VivoIn VitroBlood-brain BarrierHEK293T CellsTransfectionVirus SupernatantVirus Titer

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