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Biotin-based Pulldown Assay to Validate mRNA Targets of Cellular miRNAs

Pulldown biotina-baseado do ensaio para validar mRNA miRNAs alvos de celular

português

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11:00 min

•

June 12, 2018

DOI:

10.3791/57786-v

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10.3791/57786-v

•

11:00 min
June 12, 2018

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1School of Biotechnology,Kalinga Institute of Industrial Technology University, 21. Center for AIDS Health Disparities Research Department of Biochemistry and Cancer Biology,Meharry Medical College, 3Kalinga Institute of Industrial Technology University

Summary

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Este relatório descreve um método rápido e confiável para validar alvos de mRNA de miRNAs celulares. O método usa biotinilado sintético baseado no LNA de ácido nucleico trancado miRNA imita para capturar o alvo do mRNA. Posteriormente, grânulos magnéticos streptavidin-revestidas são empregados para pulldown o alvo mRNA para quantificação por qPCR reação em cadeia da polimerase.

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Biotinylated MiRNA MimicsMRNA TargetsPulldown AssayLocked Nucleic AcidsStreptavidin-coated Magnetic BeadsMiRNA-mRNA InteractionsMiRNA BiologyMiRNA Therapeutics

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Dash, S., Balasubramaniam, M., Dash, C., Pandhare, J. Biotin-based Pulldown Assay to Validate mRNA Targets of Cellular miRNAs. J. Vis. Exp. (136), e57786, doi:10.3791/57786 (2018).

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