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Digestión de proteínas, ultrafiltración y cromatografía por exclusión de tamaño para optimizar el aislamiento de exosomas de suero y Plasma de sangre humana
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Chapters
- 00:04Title
- 01:06Preparation of Crude Sample (Either Plasma or Serum) by Pelleting Larger Vesicles and Cellular Debris
- 02:04Digestion of Non-exosomal Blood Proteins and Removal of Small Proteins/Peptides by Centrifuge Ultrafiltration
- 04:21Purification of Vesicles by Size Exclusion Chromatography (SEC)
- 05:45Concentration of Purified Exosomes/Total Protein Quantification and Quantification/Sizing of Exosomes by Nanoparticle Tracking Analysis (NTA)
- 07:09Results: Increased Vesicle Yield and Exosome-specific Markers After Purification
- 08:15Conclusion
Aquí, presentamos un protocolo para purificar exosomas de plasma y suero con menor Co purificación de proteínas de la sangre no exosomal. El protocolo optimizado incluye tratamiento con proteasas y ultrafiltración y cromatografía por exclusión de tamaño. Mayor purificación de exosomas beneficios aguas abajo los análisis, incluyendo la cuantificación más exacta de las vesículas y caracterización proteómica.
