Un protocollo per l'identificazione di interazioni proteina-proteina Sulla base di<sup> 15</sup> N marcatura metabolica, immunoprecipitazione, Spettrometria di massa quantitativa e di affinità di modulazione
A Protocol for the Identification of Protein-protein Interactions Based on 15N Metabolic Labeling, Immunoprecipitation, Quantitative Mass Spectrometry and Affinity Modulation
Un protocollo per l'identificazione di interazioni proteina-proteina Sulla base di<sup> 15</sup> N marcatura metabolica, immunoprecipitazione, Spettrometria di massa quantitativa e di affinità di modulazione
Vi presentiamo una variante del RAPIDO (immunoprecipitazione quantitativi combinazione con smontabile), approccio che è stato introdotto in precedenza per distinguere tra vero e falso interazioni proteina-proteina. Il nostro approccio è basato sulla<sup> 15N</sup> Marcatura metabolica, la modulazione di affinità di interazioni proteina-proteina dalla presenza / assenza di ATP, immunoprecipitazione e spettrometria di massa quantitativa.
Schmollinger, S., Strenkert, D., Offeddu, V., Nordhues, A., Sommer, F., Schroda, M. A Protocol for the Identification of Protein-protein Interactions Based on 15N Metabolic Labeling, Immunoprecipitation, Quantitative Mass Spectrometry and Affinity Modulation. J. Vis. Exp. (67), e4083, doi:10.3791/4083 (2012).