A Protocol for the Identification of Protein-protein Interactions Based on 15N Metabolic Labeling, Immunoprecipitation, Quantitative Mass Spectrometry and Affinity Modulation

Stefan Schmollinger; Daniela Strenkert; Vittoria Offeddu; Andr&#233; Nordhues; Frederik Sommer; Michael Schroda

doi:10.3791/4083

/

Een protocol voor de identificatie van eiwit-eiwit interacties op basis van 15 N Metabole Labeling, Immunoprecipitatie, kwantitatieve Massaspectrometrie en Affiniteit Modulatie

JoVE Journal
Biology

This content is Free Access.

JoVE Journal Biology

A Protocol for the Identification of Protein-protein Interactions Based on ¹⁵N Metabolic Labeling, Immunoprecipitation, Quantitative Mass Spectrometry and Affinity Modulation

Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Een protocol voor de identificatie van eiwit-eiwit interacties op basis van 15 N Metabole Labeling, Immunoprecipitatie, kwantitatieve Massaspectrometrie en Affiniteit Modulatie

20,211 Views

•

14:44 min

•

September 24, 2012

DOI:

10.3791/4083-v

DOI:

10.3791/4083-v

•

14:44 min

September 24, 2012

•

1 Views

Stefan Schmollinger^1,2, Daniela Strenkert^1,2, Vittoria Offeddu^1,2, André Nordhues^1,2, Frederik Sommer^1,2, Michael Schroda^1,2

¹Max Planck Institute of Molecular Plant Physiology, ²University of Kaiserslautern

Summary

Wij presenteren een variatie van de QUICK (kwantitatieve Immunoprecipitatie combinatie met Knockdown) benadering die eerder werd onderscheid te maken tussen echte en valse eiwit-eiwit interacties. Onze aanpak is gebaseerd op 15N Metabolische labeling, de modulatie van affiniteiten van eiwit-eiwit interacties door de aanwezigheid / afwezigheid van ATP, immunoprecipitatie en kwantitatieve massaspectrometrie.

Explore More Videos

Protein-protein Interactions 15N Metabolic Labeling Immunoprecipitation Quantitative Mass Spectrometry Affinity Modulation Co-immunoprecipitation Targeted Approach Mass Spectrometry (LC-MS/MS)False Positive Discoveries RNAi QUICK (QUantitative Immunoprecipitation Combined With Knockdown)

Read Article

Een protocol voor de identificatie van eiwit-eiwit interacties op basis van<sup> 15</sup> N Metabole Labeling, Immunoprecipitatie, kwantitatieve Massaspectrometrie en Affiniteit Modulatie

Automatically Generated

Summary

Automatically generated

Explore More Videos