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Ein Protokoll für die Identifizierung von Protein-Protein-Wechselwirkungen Basierend auf<sup> 15</sup> N Metabolische Markierung, Immunpräzipitation, Quantitative Massenspektrometrie und Affinity Modulation
JoVE Journal
Biology
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JoVE Journal Biology
A Protocol for the Identification of Protein-protein Interactions Based on 15N Metabolic Labeling, Immunoprecipitation, Quantitative Mass Spectrometry and Affinity Modulation

Ein Protokoll für die Identifizierung von Protein-Protein-Wechselwirkungen Basierend auf<sup> 15</sup> N Metabolische Markierung, Immunpräzipitation, Quantitative Massenspektrometrie und Affinity Modulation

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September 24, 2012

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September 24, 2012

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Wir präsentieren eine Variation der QUICK (quantitativen Immunpräzipitation mit Knockdown kombiniert) Ansatz, der zuvor wurde eingeführt, um zwischen wahr und falsch Protein-Protein-Wechselwirkungen zu unterscheiden. Unser Ansatz basiert auf<sup> 15N</sup> Metabolische Markierung, die Modulation der Affinitäten von Protein-Protein-Wechselwirkungen durch die Anwesenheit / Abwesenheit von ATP, Immunpräzipitation und quantitative Massenspektrometrie.

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