Um protocolo minimamente invasiva para estabilizar a coluna vertebral do mouse e executar repetitivos<em> In vivo</em> Imagem da medula espinhal usando microscopia de dois fótons é descrito. Este método combina um dispositivo de estabilização da coluna vertebral e um regime anestésico para minimizar respiratória induzida por movimentos e produzir dados de imagem-primas que não necessitam de alinhamento ou de outras pós-processamento.