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Colonnes de chromatographie d’affinité de membrane cellulaire pour identifier les métabolites végétaux spécialisés interagissant avec le récepteur B de la tropomyosine kinase immobilisée
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Cellular Membrane Affinity Chromatography Columns to Identify Specialized Plant Metabolites Interacting with Immobilized Tropomyosin Kinase Receptor B
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Colonnes de chromatographie d’affinité de membrane cellulaire pour identifier les métabolites végétaux spécialisés interagissant avec le récepteur B de la tropomyosine kinase immobilisée

DOI:
10.3791/63118-v

•

11:44 min

•

January 19, 2022

•

, , , ,
1Department of Biological Sciences,The University of Alabama, 2Department of Pharmaceutical Botany, Faculty of Pharmacy,Hacettepe University

Bölümler

  • 00:05Introduction
  • 00:52Cell Homogenization
  • 03:56Cell Membrane Solubilization
  • 04:46Cell Membrane Immobilization on IAM.PC.DD2 Particles
  • 06:23CMAC Column Packing
  • 08:57Results: Antibody Staining and Frontal Affinity Chromatography of Immobilized TrkB Receptors
  • 11:02Conclusion

Özet

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Le protocole décrit la préparation de colonnes de chromatographie d’affinité de membrane cellulaire (CMAC) avec des fragments de membrane cellulaire immobilisés contenant des protéines fonctionnelles du récepteur B de la tropomyosine kinase transmembranaire. L’utilisation des colonnes CMAC dans l’identification des métabolites végétaux spécialisés interagissant avec ces récepteurs et présents dans des mélanges naturels complexes est également expliquée.

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Cellular Membrane Affinity ChromatographyTransmembrane ReceptorsPlant MetabolitesTropomyosin Kinase ReceptorBenzamidinePMSFProtease InhibitorATPTris-HCl BufferHomogenization BufferCell HarvestingCell LysisColumn Preparation

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