Summary

Mediciones electroencefalográficas en titíes despiertos escuchando vocalizaciones conespecíficas

Published: July 26, 2024
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Summary

Para estudiar la evolución del lenguaje, es importante comparar los mecanismos cerebrales de los humanos con los de los primates no humanos. Desarrollamos un método para medir de forma no invasiva la electroencefalografía (EEG) de animales despiertos. Nos permite comparar directamente los datos de EEG entre humanos y animales a largo plazo sin dañarlos.

Abstract

La comunicación vocal juega un papel crucial en las interacciones sociales de los primates, particularmente en la supervivencia y la organización social. Los seres humanos han desarrollado una estrategia de comunicación vocal única y avanzada en forma de lenguaje. Para estudiar la evolución del lenguaje humano, es necesario investigar los mecanismos neuronales que subyacen al procesamiento vocal en los humanos, así como comprender cómo han evolucionado los mecanismos cerebrales comparándolos con los de los primates no humanos. En este trabajo, desarrollamos un método para medir de forma no invasiva la electroencefalografía (EEG) de primates no humanos despiertos. Este método de registro permite realizar estudios a largo plazo sin dañar a los animales y, lo que es más importante, nos permite comparar directamente los datos de EEG de primates no humanos con los datos humanos, lo que proporciona información sobre la evolución del lenguaje humano. En el estudio actual, utilizamos el método de registro de EEG del cuero cabelludo para investigar la actividad cerebral en respuesta a vocalizaciones específicas de la especie en titíes. Este estudio proporciona nuevos conocimientos mediante el uso de EEG del cuero cabelludo para capturar representaciones neuronales generalizadas en titíes durante la percepción vocal, llenando los vacíos en el conocimiento existente.

Introduction

Los primates utilizan vocalizaciones específicas de cada especie para transmitir información biológicamente importante, como el estado emocional de la persona que llama o su intención de mantener los lazos sociales, la presencia de depredadores u otras situaciones peligrosas. La investigación de los mecanismos neuronales que subyacen a la percepción de la vocalización en primates no humanos ricos en voz puede proporcionarnos pistas críticas para comprender mejor los orígenes evolutivos del lenguaje humano.

Los titíes comunes son pequeños primates nativos de América del Sur. En los últimos años, los titíes han sido cada vez más utilizados como animales modelo, junto con los monos macacos, debido a su alta reproductividad, facilidad de uso debido a su pequeño tamaño y el desarrollo de técnicas transgénicas útiles 1,2,3. Además de su utilidad como modelos de enfermedades, la rica comunicación vocal dentro de los grupos es otra característica única de esta especie 4,5,6,7. Los titíes intercambian señales vocales de forma rutinaria para comunicarse con congéneres invisibles en el bosque. Al examinar la actividad cerebral involucrada en la percepción y producción vocal en los titíes, podemos determinar cómo procesan la información auditiva de sus propias llamadas o llamadas conespecíficas en el cerebro e identificar qué circuitos neuronales están involucrados. Estudios previos han demostrado actividad neuronal en la corteza auditiva primaria 8,9,10,11,12 y la corteza frontal13,14 involucrada en la producción vocal en titíes. Además, estas respuestas neuronales excitadas y suprimidas fueron moduladas por interacciones auditivo-vocales en la corteza auditiva primaria 8,10. Estos estudios proporcionaron datos detallados de la actividad neuronal a nivel de una sola neurona utilizando métodos de registro invasivos. Numerosos estudios han examinado más a fondo la actividad neuronal implicada en la producción vocal de los titíes; Sin embargo, la percepción vocal sigue siendo poco conocida15,16.

Varios estudios de imagen cerebral no invasivos han dilucidado los mecanismos neuronales del procesamiento vocal en titíes 17,18,19; Su alta resolución espacial es una ventaja, sin embargo, mantener a los animales en estado despierto durante el escaneo requiere técnicas avanzadas. Sin embargo, más recientemente, Jafari et al. identificaron regiones frontotemporales implicadas en la percepción vocal en titíes despiertos utilizando imágenes de resonancia magnética funcional (fMRI)19. Casi todos los experimentos para dilucidar las funciones cerebrales involucradas en la percepción y producción vocal en humanos se han realizado utilizando métodos no invasivos, como la electroencefalografía (EEG) del cuero cabelludo, la magnetoencefalografía (MEG)20,21 y la fMRI 22,23,24. Numerosos estudios en humanos han investigado la actividad cerebral relacionada con la percepción vocal mediante EEG. La mayoría de estos estudios se han centrado en la información emocional 25,26,27 y en la prominencia de las palabras emocionales28, y los resultados revelan cambios en los potenciales relacionados con eventos durante la percepción vocal 29. La electrocorticografía (ECoG) y los registros de una sola neurona utilizando electrodos implantados intracranealmente en humanos solo se han realizado en un número limitado de experimentos en pacientes sometidos a tratamiento neuroquirúrgico30,31.

Una perspectiva evolutiva que compare a los humanos con los monos es importante para comprender los mecanismos neuronales únicos que subyacen a la percepción y producción vocal que se han desarrollado en los humanos. Para comparar directamente los mecanismos neuronales implicados en la percepción del habla y la vocalización de primates no humanos ricos en voz, como el tití, con los humanos, es importante comparar los datos entre las dos especies utilizando el mismo método. La resonancia magnética funcional permite obtener imágenes de todo el cerebro y tiene una alta resolución espacial. Tiene la ventaja de registrar la actividad perpendicular al cráneo o en regiones profundas que son difíciles de registrar con EEG o MEG. Sin embargo, la máquina de resonancia magnética es costosa de instalar y mantener, y existen muchas restricciones sobre los estímulos que se pueden presentar debido a la naturaleza del dispositivo. En comparación, el EEG, los potenciales relacionados con eventos (ERP) y el MEG tienen una alta resolución temporal, lo que los hace útiles para analizar el procesamiento vocal de series temporales. En particular, el EEG tiene las ventajas de una alta movilidad y la capacidad de ser utilizado en una variedad de entornos experimentales, un costo relativamente bajo y el requisito de un solo operador.

Dado que ya se ha obtenido una gran cantidad de datos de EEG en humanos, se necesitan métodos de medición de EEG que utilicen paradigmas no invasivos para primates no humanos. Nuestro grupo de investigación desarrolló un método único de registro de EEG no invasivo utilizando tubos32 para macacos y titíes. Aquí, reportamos varios hallazgos novedosos sobre el procesamiento auditivo en primates no humanos 33,34,35,36,37. Para caracterizar la actividad cerebral en respuesta a las vocalizaciones específicas de la especie en titíes, construimos un sistema experimental para registrar la actividad cerebral de forma no invasiva utilizando electrodos colocados en el cuero cabelludo. En este estudio, describimos el método de medición EEG para titíes.

Protocol

Todos los experimentos fueron aprobados por el Comité de Experimentación Animal del EHUB (No.2022-003, 2023-104) y se llevaron a cabo de acuerdo con la Guía para el Cuidado y Uso de Primates de Laboratorio publicada por el EHUB. Para el experimento se utilizaron nueve titíes comunes (Callithrix jacchus, seis machos y tres hembras, de 2 a 12 años, con un peso de 330 a 490 g). 1. Animales Aloje a los titíes en jaulas individuales equipadas con cajas nido…

Representative Results

En primer lugar, trazamos los potenciales promedio relacionados con eventos (ERP) para cada estímulo auditivo en los titíes (Figura 2). El potencial evocado auditivo (AEP) fue prominente en la condición de ruido , reflejando el inicio claro de los estímulos (ver Figura 1D). Para comparar los ERPs promediados entre los tipos de llamada y los estímulos de ruido, aplicamos un análisis de varianza unidireccional (ANOVA) con los estímulos como factor …

Discussion

Puntos a tener en cuenta sobre la anestesia
Se ha intentado la administración de ketamina y xilacina, y si bien estos son analgésicos y, por lo tanto, adecuados para tareas dolorosas prolongadas, los titíes tienden a experimentar disminuciones en los niveles de oxígeno en la sangre sin inhalación de oxígeno44. En resumen, el alfaxalon es probablemente el más adecuado para tareas indoloras como el afeitado o la fabricación de mascarillas. Además, para el afeitado, que d…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Este trabajo fue apoyado por el Proyecto Hakubi de la Universidad de Kyoto, Grant-in-Aid for Challenging Research (Pioneering) (No.22K18644), Grant-in-Aid for Scientific Research (C) (No. 22K12745 ), Grant-in-Aid for Scientific Research (B) (No. 21H02851) y Grant-in-Aid for Scientific Research (A) (No. 19H01039). Nos gustaría agradecer a Editage (www.editage.jp) por la edición en inglés.

Materials

Alfaxalone Meiji Animal Health Alfaxan
Amplifier Brain Products BrainAmp
Atropine Fuso Pharmaceutical Industries Atropine Sulfate Injection
Audio editor Adobe Adobe Audition
Data processing software MathWorks MATLAB version R2023a
Data processing toolbox University of California-SanDiego EEGLAB
Data processing toolbox University of California-Davis ERPLAB
Electric shaver Panasonic ER803PPA
Electrode Unique Medical UL-3010 AgCl coated (custom)
Electrode gel Neurospec AG V16 SuperVisc
Electrode input box Brain Products EIB64-DUO 64ch
Glue 3M Scotch 7005S
Hair removering cream Kracie epilat for sensitive skin
Isoflurane Bussan Animal Health ds isoflurane
Liquid gum San-ei Yakuhin Boeki Arabic Call SS Gum arabic+water
Liquid nutrition Nestlé Health Science Company Isocal 1.0 Junior Polymeric formula
Maropitant Zoetis  Cerenia injectable solution
Monitor Camera Intel RealSense LiDAR Camera L515
Monkey pellets Oriental Yeast SPS
Primate chair Natsume Seisakusho Order made
Pulse oximeters Covident Nellcor PM10N
Skin prepping pasta  Mammendorfer Institut für Physik und Medizin NeuPrep
Slicon tube AsONE Φ4 x 7mm
Speaker Fostex PM0.3
Synchronization device Brain Vision StimTrak
Thermoplastic mask CIVCO MTAPU Type Uniframe Thermoplastic Mask 2.4mm

References

  1. Miller, C. T., et al. Marmosets: A neuroscientific model of human social behavior. Neuron. 90 (2), 219-233 (2016).
  2. Okano, H., Hikishima, K., Iriki, A., Sasaki, E. The common marmoset as a novel animal model system for biomedical and neuroscience research applications. Semin Fetal Neonatal Med. 17 (6), 336-340 (2012).
  3. t’Hart, B. A., Abbott, D. H., Nakamura, K., Fuchs, E. The marmoset monkey: a multi-purpose preclinical and translational model of human biology and disease. Drug Discov Today. 17 (21-22), 1160-1165 (2012).
  4. Bezerra, B. M., Souto, A. Structure and usage of the vocal repertoire of Callithrix jacchus. Int J Primatol. 29 (3), 671-701 (2008).
  5. Agamaite, J. A., Chang, C. J., Osmanski, M. S., Wang, X. A quantitative acoustic analysis of the vocal repertoire of the common marmoset (Callithrix jacchus). J Acoust Soc Am. 138 (5), 2906-2928 (2015).
  6. Pistorio, A. L., Vintch, B., Wang, X. Acoustic analysis of vocal development in a New World primate, the common marmoset (Callithrix jacchus). J Acoust Soc Am. 120 (3), 1655-1670 (2006).
  7. Grijseels, D. M., Prendergast, B. J., Gorman, J. C., Miller, C. T. The neurobiology of vocal communication in marmosets. Ann N. Y. Acad Sci. 1528 (1), 13-28 (2023).
  8. Eliades, S. J., Wang, X. Neural substrates of vocalization feedback monitoring in primate auditory cortex. Nature. 453 (7198), 1102-1106 (2008).
  9. Eliades, S. J., Wang, X. Comparison of auditory-vocal interactions across multiple types of vocalizations in marmoset auditory cortex. J Neurophysiol. 109 (6), 1638-1657 (2013).
  10. Eliades, S. J., Wang, X. Contributions of sensory tuning to auditory-vocal interactions in marmoset auditory cortex. Hear Res. 348, 98-111 (2017).
  11. Eliades, S. J., Wang, X. Neural correlates of the lombard effect in primate auditory cortex. J Neurosci. 32 (31), 10737-10748 (2012).
  12. Tsunada, J., Wang, X., Eliades, S. J. Multiple processes of vocal sensory-motor interaction in primate auditory cortex. Nat Commun. 15 (1), 3093 (2024).
  13. Miller, C. T., Thomas, A. W., Nummela, S. U., de la Mothe, L. A. Responses of primate frontal cortex neurons during natural vocal communication. J Neurophysiol. 114 (2), 1158-1171 (2015).
  14. Roy, S., Zhao, L., Wang, X. Distinct neural activities in premotor cortex during natural vocal behaviors in a New World Primate, the common marmoset (Callithrix jacchus). J Neurosci. 36 (48), 12168-12179 (2016).
  15. Wang, X., Merzenich, M. M., Beitel, R., Schreiner, C. E. Representation of a species-specific vocalization in the primary auditory cortex of the common marmoset: temporal and spectral characteristics. J Neurophysiol. 74 (6), 2685-2706 (1995).
  16. Zeng, H. -. h., et al. Distinct neuron populations for simple and compound calls in the primary auditory cortex of awake marmosets. National Science Review. 8 (11), nwab126 (2021).
  17. Sadagopan, S., Temiz-Karayol, N. Z., Voss, H. U. High-field functional magnetic resonance imaging of vocalization processing in marmosets. Sci Rep. 5, 10950 (2015).
  18. Kato, M., et al. Individual identity and affective valence in marmoset calls: in vivo brain imaging with vocal sound playback. Anim Cogn. 21 (3), 331-343 (2018).
  19. Jafari, A., et al. A vocalization-processing network in marmosets. Cell Rep. 42 (5), 112526 (2023).
  20. Papanicolaou, A. C., et al. Differential brain activation patterns during perception of voice and tone onset time series: a MEG study. Neuroimage. 18 (2), 448-459 (2003).
  21. Capilla, A., Belin, P., Gross, J. The early spatio-temporal correlates and task independence of cerebral voice processing studied with MEG. Cereb Cortex. 23 (6), 1388-1395 (2012).
  22. Belin, P., Zatorre, R. J., Lafaille, P., Ahad, P., Pike, B. Voice-selective areas in human auditory cortex. Nature. 403 (6767), 309-312 (2000).
  23. Perrodin, C., Kayser, C., Abel, T. J., Logothetis, N. K., Petkov, C. I. Who is that? Brain networks and mechanisms for identifying individuals. Trends Cogn Sci. 19 (12), 783-796 (2015).
  24. Pernet, C. R., et al. The human voice areas: Spatial organization and inter-individual variability in temporal and extra-temporal cortices. Neuroimage. 119, 164-174 (2015).
  25. Chen, X., Pan, Z., Wang, P., Zhang, L., Yuan, J. EEG oscillations reflect task effects for the change detection in vocal emotion. Cogn Neurodyn. 9 (3), 351-358 (2015).
  26. Hiyoshi-Taniguchi, K., et al. EEG correlates of voice and face emotional judgments in the human brain. Cogn Comput. 7 (1), 11-19 (2015).
  27. Lévêque, Y., Schön, D. Listening to the human voice alters sensorimotor brain rhythms. PloS One. 8, e80659 (2013).
  28. Liu, T., et al. Electrophysiological insights into processing nonverbal emotional vocalizations. NeuroReport. 23, 108-112 (2012).
  29. Bruneau, N., et al. Early neurophysiological correlates of vocal versus non-vocal sound processing in adults. Brain Res. 1528, 20-27 (2013).
  30. Flinker, A., et al. Single-Trial speech suppression of auditory cortex activity in humans. J Neurosci. 30, 16643-16650 (2010).
  31. Greenlee, J. D. W., et al. Human auditory cortical activation during self-vocalization. PloS One. 6 (3), e14744 (2011).
  32. Itoh, K., Konoike, N., Iwaoki, H., Igarashi, H., Nakamura, K. A novel "dip-in electrode" method for electrode application to record noninvasive scalp electroencephalograms and evoked potentials in an awake common marmoset. Neuroimage: Reports. 2 (3), 100116 (2022).
  33. Itoh, K., et al. Cerebral cortical processing time is elongated in human brain evolution. Sci Rep. 12 (1), 1103 (2022).
  34. Itoh, K., Nejime, M., Konoike, N., Nakamura, K., Nakada, T. Evolutionary elongation of the time window of integration in auditory cortex: macaque vs. human comparison of the effects of sound duration on auditory evoked potentials. Front Neurosci. 13, 630 (2019).
  35. Itoh, K., Iwaoki, H., Konoike, N., Igarashi, H., Nakamura, K. Noninvasive scalp recording of the middle latency responses and cortical auditory evoked potentials in the alert common marmoset. Hear Res. 405, 108229 (2021).
  36. Itoh, K., Nejime, M., Konoike, N., Nakada, T., Nakamura, K. Noninvasive scalp recording of cortical auditory evoked potentials in the alert macaque monkey. Hear Res. 327, 117-125 (2015).
  37. Konoike, N., et al. Comparison of noninvasive, scalp-recorded auditory steady-state responses in humans, rhesus monkeys, and common marmosets. Sci Rep. 12 (1), 9210 (2022).
  38. Eliades, S. J., Miller, C. T. Marmoset vocal communication: Behavior and neurobiology. Dev Neurobiol. 77 (3), 286-299 (2017).
  39. Ray, S., Hsiao, S. S., Crone, N. E., Franaszczuk, P. J., Niebur, E. Effect of stimulus intensity on the spike-local field potential relationship in the secondary somatosensory cortex. J Neurosci. 28 (29), 7334-7343 (2008).
  40. Leonard, M. K., et al. Large-scale single-neuron speech sound encoding across the depth of human cortex. Nature. 626 (7999), 593-602 (2024).
  41. Dubey, A., Ray, S. Comparison of tuning properties of gamma and high-gamma power in local field potential (LFP) versus electrocorticogram (ECoG) in visual cortex. Sci Rep. 10 (1), 5422 (2020).
  42. Ray, S., Crone, N. E., Niebur, E., Franaszczuk, P. J., Hsiao, S. S. Neural correlates of high-gamma oscillations (60-200 Hz) in Macaque local field potentials and their potential implications in electrocorticography. Journal Neurosci. 28 (45), 11526-11536 (2008).
  43. Buzsáki, G., Anastassiou, C. A., Koch, C. The origin of extracellular fields and currents–EEG, ECoG, LFP and spikes. Nat Rev Neurosci. 13 (6), 407-420 (2012).
  44. Konoike, N., Miwa, M., Ishigami, A., Nakamura, K. Hypoxemia after single-shot anesthesia in common marmosets. J Med Primatol. 46 (3), 70-74 (2017).
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Konoike, N., Miwa, M., Itoh, K., Nakamura, K. Electroencephalography Measurements in Awake Marmosets Listening to Conspecific Vocalizations . J. Vis. Exp. (209), e66869, doi:10.3791/66869 (2024).

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