Summary

Elektro-encefalografiemetingen bij wakkere zijdeaapjes die luisteren naar specifieke vocalisaties

Published: July 26, 2024
doi:

Summary

Om de evolutie van taal te bestuderen, is het belangrijk om hersenmechanismen bij mensen te vergelijken met die bij niet-menselijke primaten. We ontwikkelden een methode om op een niet-invasieve manier de elektro-encefalografie (EEG) van wakkere dieren te meten. Het stelt ons in staat om EEG-gegevens tussen mens en dier op de lange termijn direct te vergelijken zonder ze te schaden.

Abstract

Vocale communicatie speelt een cruciale rol in de sociale interacties van primaten, met name bij overleving en sociale organisatie. Mensen hebben een unieke en geavanceerde vocale communicatiestrategie ontwikkeld in de vorm van taal. Om de evolutie van de menselijke taal te bestuderen, is het noodzakelijk om de neurale mechanismen te onderzoeken die ten grondslag liggen aan vocale verwerking bij mensen, en om te begrijpen hoe hersenmechanismen zijn geëvolueerd door ze te vergelijken met die van niet-menselijke primaten. Hierin ontwikkelden we een methode om de elektro-encefalografie (EEG) van wakkere niet-menselijke primaten niet-invasief te meten. Deze registratiemethode maakt langetermijnstudies mogelijk zonder de dieren schade toe te brengen, en, belangrijker nog, stelt ons in staat om EEG-gegevens van niet-menselijke primaten direct te vergelijken met menselijke gegevens, waardoor inzicht wordt verkregen in de evolutie van de menselijke taal. In de huidige studie gebruikten we de hoofdhuid-EEG-opnamemethode om hersenactiviteit te onderzoeken als reactie op soortspecifieke vocalisaties bij zijdeaapjes. Deze studie biedt nieuwe inzichten door hoofdhuid-EEG te gebruiken om wijdverspreide neurale representaties in zijdeaapjes vast te leggen tijdens vocale perceptie, waardoor hiaten in bestaande kennis worden opgevuld.

Introduction

Primaten gebruiken soortspecifieke vocalisaties om biologisch belangrijke informatie over te brengen, zoals de emotionele toestand van de beller of de intentie om sociale banden te onderhouden, de aanwezigheid van roofdieren of andere gevaarlijke situaties. Onderzoek naar de neurale mechanismen die ten grondslag liggen aan de perceptie van vocalisatie bij vocale niet-menselijke primaten kan ons cruciale aanwijzingen geven om de evolutionaire oorsprong van menselijke taal beter te begrijpen.

Gewone zijdeaapjes zijn kleine primaten afkomstig uit Zuid-Amerika. In de afgelopen jaren worden zijdeaapjes steeds vaker gebruikt als modeldieren, naast makaakapen, vanwege hun hoge reproductie, gebruiksgemak vanwege hun kleine formaat en de ontwikkeling van nuttige transgene technieken 1,2,3. Naast hun bruikbaarheid als ziektemodellen is rijke vocale communicatie binnen groepen een ander uniek kenmerk van deze soort 4,5,6,7. Marmosets wisselen routinematig vocale signalen uit om te communiceren met onzichtbare soortgenoten in het bos. Door de hersenactiviteit te onderzoeken die betrokken is bij vocale waarneming en productie bij zijdeaapjes, kunnen we bepalen hoe ze de auditieve informatie van hun eigen of specifieke oproepen in de hersenen verwerken en identificeren welke neurale circuits erbij betrokken zijn. Eerdere studies hebben neurale activiteit aangetoond in de primaire auditieve cortex 8,9,10,11,12 en frontale cortex 13,14 die betrokken zijn bij de vocale productie bij zijdeaapjes. Bovendien werden deze opgewonden en onderdrukte neuronale reacties gemoduleerd door auditief-vocale interacties in de primaire auditieve cortex 8,10. Deze studies leverden gedetailleerde neurale activiteitsgegevens op het niveau van één neuron met behulp van invasieve registratiemethoden. Talrijke studies hebben de neurale activiteit die betrokken is bij de vocale productie van zijdeaapjes verder onderzocht; Vocale perceptie blijft echter slecht begrepen15,16.

Verschillende niet-invasieve hersenbeeldvormingsonderzoeken hebben de neurale mechanismen van vocale verwerking bij zijdeaapjes opgehelderd 17,18,19; Hun hoge ruimtelijke resolutie is een voordeel, maar om dieren tijdens het scannen in wakkere toestand te houden, zijn geavanceerde technieken nodig. Echter, meer recentelijk, Jafari et al. identificeerden frontotemporale regio’s die betrokken zijn bij vocale perceptie bij wakkere zijdeaapjes met behulp van functionele magnetische resonantiebeeldvorming (fMRI)19. Bijna alle experimenten om de hersenfuncties op te helderen die betrokken zijn bij vocale perceptie en productie bij mensen zijn uitgevoerd met behulp van niet-invasieve methoden, zoals elektro-encefalografie van de hoofdhuid (EEG), magneto-encefalografie (MEG)20,21 en fMRI 22,23,24. Talrijke studies bij mensen hebben hersenactiviteit onderzocht die verband houdt met vocale perceptie met behulp van EEG. De meeste van deze onderzoeken hebben zich gericht op emotionele informatie 25,26,27 en de opvallendheid van emotionele woorden 28, waarbij de resultaten veranderingen in gebeurtenisgerelateerde potentialen tijdens vocale perceptie onthullen29. Elektrocorticografie (ECoG) en opnames van één neuron met behulp van intracraniaal geïmplanteerde elektroden bij mensen zijn alleen uitgevoerd in een beperkt aantal experimenten bij patiënten die een neurochirurgische behandeling ondergaan30,31.

Een evolutionair perspectief waarin mensen met apen worden vergeleken, is belangrijk bij het begrijpen van de unieke neurale mechanismen die ten grondslag liggen aan vocale perceptie en productie die zich bij mensen hebben ontwikkeld. Om de neurale mechanismen die betrokken zijn bij spraakperceptie en vocalisatie bij vocaal-rijke niet-menselijke primaten, zoals de zijdeaapje, direct te vergelijken met mensen, is het belangrijk om gegevens tussen de twee soorten te vergelijken met behulp van dezelfde methode. Functionele MRI maakt beeldvorming van de hele hersenen mogelijk en heeft een hoge ruimtelijke resolutie. Het heeft het voordeel dat het activiteit registreert die loodrecht op de schedel staat of in diepe gebieden die moeilijk te registreren zijn met EEG of MEG. De MRI-machine is echter duur om te installeren en te onderhouden, en er zijn veel beperkingen aan de stimuli die kunnen worden gepresenteerd vanwege de aard van het apparaat. Ter vergelijking: EEG, event-related potentials (ERP’s) en MEG hebben een hoge temporele resolutie, waardoor ze nuttig zijn voor het analyseren van vocale verwerking van tijdreeksen. EEG heeft met name de voordelen van een hoge mobiliteit en de mogelijkheid om in verschillende experimentele omgevingen te worden gebruikt, relatief lage kosten en de vereiste voor slechts één operator.

Aangezien er al een grote hoeveelheid EEG-gegevens bij mensen is verkregen, zijn EEG-meetmethoden met behulp van niet-invasieve paradigma’s nodig voor niet-menselijke primaten. Onze onderzoeksgroep ontwikkelde een unieke niet-invasieve EEG-opnamemethode met behulp van buisjes32 voor makaken en zijdeaapjes. Hier rapporteren we verschillende nieuwe bevindingen met betrekking tot auditieve verwerking bij niet-menselijke primaten 33,34,35,36,37. Om de hersenactiviteit te karakteriseren als reactie op soortspecifieke vocalisaties in zijdeaapjes, hebben we een experimenteel systeem geconstrueerd om niet-invasief hersenactiviteit vast te leggen met behulp van elektroden die op de hoofdhuid worden geplaatst. In deze studie beschrijven we de EEG-meetmethode voor zijdeaapjes.

Protocol

Alle experimenten zijn goedgekeurd door de Commissie dierproeven van EHUB (nr. 2022-003, 2023-104) en uitgevoerd in overeenstemming met de door EHUB gepubliceerde Gids voor de verzorging en het gebruik van laboratoriumprimaten. Negen gewone zijdeaapjes (Callithrix jacchus, zes mannetjes en drie vrouwtjes, 2-12 jaar oud, met een gewicht van 330-490 g) werden gebruikt voor het experiment. 1. Dieren Huisvest de zijdeaapjes in eenpersoonskooien die zijn uitgerus…

Representative Results

Eerst hebben we de gemiddelde event-related potentials (ERP’s) uitgezet voor elke auditieve stimulus in de zijdeaapjes (Figuur 2). Het auditief opgewekte potentieel (AEP) was prominent aanwezig in de toestand Lawaai , wat het duidelijke begin van de stimuli weerspiegelt (zie figuur 1D). Om de gemiddelde ERP’s tussen gesprekstypen en ruisstimuli te vergelijken, pasten we een eenrichtingsvariantieanalyse (ANOVA) toe met stimuli als de between-subject-fact…

Discussion

Aandachtspunten over anesthesie
Er is geprobeerd zowel ketamine als xylazine toe te dienen, en hoewel deze pijnstillend zijn en daarom geschikt zijn voor lange pijnlijke taken, hebben zijdeaapjes de neiging om een daling van het zuurstofgehalte in het bloed te ervaren zonder zuurstofinhalatie44. Kortom, alfaxalon is waarschijnlijk het meest geschikt voor pijnloze taken zoals scheren of het maken van maskers. Bovendien zou voor het scheren, dat slechts 10-15 minuten duurt, inhal…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Dit werk werd ondersteund door het Hakubi-project van de Universiteit van Kyoto, Grant-in-Aid for Challenging Research (Pioneering) (No.22K18644), Grant-in-Aid for Scientific Research (C) (No. 22K12745 ), Grant-in-Aid for Scientific Research (B) (No. 21H02851) en Grant-in-Aid for Scientific Research (A) (No. 19H01039). We willen Editage (www.editage.jp) bedanken voor de Engelstalige redactie.

Materials

Alfaxalone Meiji Animal Health Alfaxan
Amplifier Brain Products BrainAmp
Atropine Fuso Pharmaceutical Industries Atropine Sulfate Injection
Audio editor Adobe Adobe Audition
Data processing software MathWorks MATLAB version R2023a
Data processing toolbox University of California-SanDiego EEGLAB
Data processing toolbox University of California-Davis ERPLAB
Electric shaver Panasonic ER803PPA
Electrode Unique Medical UL-3010 AgCl coated (custom)
Electrode gel Neurospec AG V16 SuperVisc
Electrode input box Brain Products EIB64-DUO 64ch
Glue 3M Scotch 7005S
Hair removering cream Kracie epilat for sensitive skin
Isoflurane Bussan Animal Health ds isoflurane
Liquid gum San-ei Yakuhin Boeki Arabic Call SS Gum arabic+water
Liquid nutrition Nestlé Health Science Company Isocal 1.0 Junior Polymeric formula
Maropitant Zoetis  Cerenia injectable solution
Monitor Camera Intel RealSense LiDAR Camera L515
Monkey pellets Oriental Yeast SPS
Primate chair Natsume Seisakusho Order made
Pulse oximeters Covident Nellcor PM10N
Skin prepping pasta  Mammendorfer Institut für Physik und Medizin NeuPrep
Slicon tube AsONE Φ4 x 7mm
Speaker Fostex PM0.3
Synchronization device Brain Vision StimTrak
Thermoplastic mask CIVCO MTAPU Type Uniframe Thermoplastic Mask 2.4mm

References

  1. Miller, C. T., et al. Marmosets: A neuroscientific model of human social behavior. Neuron. 90 (2), 219-233 (2016).
  2. Okano, H., Hikishima, K., Iriki, A., Sasaki, E. The common marmoset as a novel animal model system for biomedical and neuroscience research applications. Semin Fetal Neonatal Med. 17 (6), 336-340 (2012).
  3. t’Hart, B. A., Abbott, D. H., Nakamura, K., Fuchs, E. The marmoset monkey: a multi-purpose preclinical and translational model of human biology and disease. Drug Discov Today. 17 (21-22), 1160-1165 (2012).
  4. Bezerra, B. M., Souto, A. Structure and usage of the vocal repertoire of Callithrix jacchus. Int J Primatol. 29 (3), 671-701 (2008).
  5. Agamaite, J. A., Chang, C. J., Osmanski, M. S., Wang, X. A quantitative acoustic analysis of the vocal repertoire of the common marmoset (Callithrix jacchus). J Acoust Soc Am. 138 (5), 2906-2928 (2015).
  6. Pistorio, A. L., Vintch, B., Wang, X. Acoustic analysis of vocal development in a New World primate, the common marmoset (Callithrix jacchus). J Acoust Soc Am. 120 (3), 1655-1670 (2006).
  7. Grijseels, D. M., Prendergast, B. J., Gorman, J. C., Miller, C. T. The neurobiology of vocal communication in marmosets. Ann N. Y. Acad Sci. 1528 (1), 13-28 (2023).
  8. Eliades, S. J., Wang, X. Neural substrates of vocalization feedback monitoring in primate auditory cortex. Nature. 453 (7198), 1102-1106 (2008).
  9. Eliades, S. J., Wang, X. Comparison of auditory-vocal interactions across multiple types of vocalizations in marmoset auditory cortex. J Neurophysiol. 109 (6), 1638-1657 (2013).
  10. Eliades, S. J., Wang, X. Contributions of sensory tuning to auditory-vocal interactions in marmoset auditory cortex. Hear Res. 348, 98-111 (2017).
  11. Eliades, S. J., Wang, X. Neural correlates of the lombard effect in primate auditory cortex. J Neurosci. 32 (31), 10737-10748 (2012).
  12. Tsunada, J., Wang, X., Eliades, S. J. Multiple processes of vocal sensory-motor interaction in primate auditory cortex. Nat Commun. 15 (1), 3093 (2024).
  13. Miller, C. T., Thomas, A. W., Nummela, S. U., de la Mothe, L. A. Responses of primate frontal cortex neurons during natural vocal communication. J Neurophysiol. 114 (2), 1158-1171 (2015).
  14. Roy, S., Zhao, L., Wang, X. Distinct neural activities in premotor cortex during natural vocal behaviors in a New World Primate, the common marmoset (Callithrix jacchus). J Neurosci. 36 (48), 12168-12179 (2016).
  15. Wang, X., Merzenich, M. M., Beitel, R., Schreiner, C. E. Representation of a species-specific vocalization in the primary auditory cortex of the common marmoset: temporal and spectral characteristics. J Neurophysiol. 74 (6), 2685-2706 (1995).
  16. Zeng, H. -. h., et al. Distinct neuron populations for simple and compound calls in the primary auditory cortex of awake marmosets. National Science Review. 8 (11), nwab126 (2021).
  17. Sadagopan, S., Temiz-Karayol, N. Z., Voss, H. U. High-field functional magnetic resonance imaging of vocalization processing in marmosets. Sci Rep. 5, 10950 (2015).
  18. Kato, M., et al. Individual identity and affective valence in marmoset calls: in vivo brain imaging with vocal sound playback. Anim Cogn. 21 (3), 331-343 (2018).
  19. Jafari, A., et al. A vocalization-processing network in marmosets. Cell Rep. 42 (5), 112526 (2023).
  20. Papanicolaou, A. C., et al. Differential brain activation patterns during perception of voice and tone onset time series: a MEG study. Neuroimage. 18 (2), 448-459 (2003).
  21. Capilla, A., Belin, P., Gross, J. The early spatio-temporal correlates and task independence of cerebral voice processing studied with MEG. Cereb Cortex. 23 (6), 1388-1395 (2012).
  22. Belin, P., Zatorre, R. J., Lafaille, P., Ahad, P., Pike, B. Voice-selective areas in human auditory cortex. Nature. 403 (6767), 309-312 (2000).
  23. Perrodin, C., Kayser, C., Abel, T. J., Logothetis, N. K., Petkov, C. I. Who is that? Brain networks and mechanisms for identifying individuals. Trends Cogn Sci. 19 (12), 783-796 (2015).
  24. Pernet, C. R., et al. The human voice areas: Spatial organization and inter-individual variability in temporal and extra-temporal cortices. Neuroimage. 119, 164-174 (2015).
  25. Chen, X., Pan, Z., Wang, P., Zhang, L., Yuan, J. EEG oscillations reflect task effects for the change detection in vocal emotion. Cogn Neurodyn. 9 (3), 351-358 (2015).
  26. Hiyoshi-Taniguchi, K., et al. EEG correlates of voice and face emotional judgments in the human brain. Cogn Comput. 7 (1), 11-19 (2015).
  27. Lévêque, Y., Schön, D. Listening to the human voice alters sensorimotor brain rhythms. PloS One. 8, e80659 (2013).
  28. Liu, T., et al. Electrophysiological insights into processing nonverbal emotional vocalizations. NeuroReport. 23, 108-112 (2012).
  29. Bruneau, N., et al. Early neurophysiological correlates of vocal versus non-vocal sound processing in adults. Brain Res. 1528, 20-27 (2013).
  30. Flinker, A., et al. Single-Trial speech suppression of auditory cortex activity in humans. J Neurosci. 30, 16643-16650 (2010).
  31. Greenlee, J. D. W., et al. Human auditory cortical activation during self-vocalization. PloS One. 6 (3), e14744 (2011).
  32. Itoh, K., Konoike, N., Iwaoki, H., Igarashi, H., Nakamura, K. A novel "dip-in electrode" method for electrode application to record noninvasive scalp electroencephalograms and evoked potentials in an awake common marmoset. Neuroimage: Reports. 2 (3), 100116 (2022).
  33. Itoh, K., et al. Cerebral cortical processing time is elongated in human brain evolution. Sci Rep. 12 (1), 1103 (2022).
  34. Itoh, K., Nejime, M., Konoike, N., Nakamura, K., Nakada, T. Evolutionary elongation of the time window of integration in auditory cortex: macaque vs. human comparison of the effects of sound duration on auditory evoked potentials. Front Neurosci. 13, 630 (2019).
  35. Itoh, K., Iwaoki, H., Konoike, N., Igarashi, H., Nakamura, K. Noninvasive scalp recording of the middle latency responses and cortical auditory evoked potentials in the alert common marmoset. Hear Res. 405, 108229 (2021).
  36. Itoh, K., Nejime, M., Konoike, N., Nakada, T., Nakamura, K. Noninvasive scalp recording of cortical auditory evoked potentials in the alert macaque monkey. Hear Res. 327, 117-125 (2015).
  37. Konoike, N., et al. Comparison of noninvasive, scalp-recorded auditory steady-state responses in humans, rhesus monkeys, and common marmosets. Sci Rep. 12 (1), 9210 (2022).
  38. Eliades, S. J., Miller, C. T. Marmoset vocal communication: Behavior and neurobiology. Dev Neurobiol. 77 (3), 286-299 (2017).
  39. Ray, S., Hsiao, S. S., Crone, N. E., Franaszczuk, P. J., Niebur, E. Effect of stimulus intensity on the spike-local field potential relationship in the secondary somatosensory cortex. J Neurosci. 28 (29), 7334-7343 (2008).
  40. Leonard, M. K., et al. Large-scale single-neuron speech sound encoding across the depth of human cortex. Nature. 626 (7999), 593-602 (2024).
  41. Dubey, A., Ray, S. Comparison of tuning properties of gamma and high-gamma power in local field potential (LFP) versus electrocorticogram (ECoG) in visual cortex. Sci Rep. 10 (1), 5422 (2020).
  42. Ray, S., Crone, N. E., Niebur, E., Franaszczuk, P. J., Hsiao, S. S. Neural correlates of high-gamma oscillations (60-200 Hz) in Macaque local field potentials and their potential implications in electrocorticography. Journal Neurosci. 28 (45), 11526-11536 (2008).
  43. Buzsáki, G., Anastassiou, C. A., Koch, C. The origin of extracellular fields and currents–EEG, ECoG, LFP and spikes. Nat Rev Neurosci. 13 (6), 407-420 (2012).
  44. Konoike, N., Miwa, M., Ishigami, A., Nakamura, K. Hypoxemia after single-shot anesthesia in common marmosets. J Med Primatol. 46 (3), 70-74 (2017).
This article has been published
Video Coming Soon
Keep me updated:

.

Cite This Article
Konoike, N., Miwa, M., Itoh, K., Nakamura, K. Electroencephalography Measurements in Awake Marmosets Listening to Conspecific Vocalizations . J. Vis. Exp. (209), e66869, doi:10.3791/66869 (2024).

View Video