H형 고혈압을 가진 쥐에서 Huotan Jiedu Tongluo 달인의 항고혈압 효과 및 메커니즘
Summary
여기에서는 H형 고혈압을 유도하기 위한 프로토콜을 제시하고 위내 투여 Huotan Jiedu Tongluo 달인(HTJDTLD)의 항고혈압 효과를 평가합니다. H형 고혈압이 있는 쥐에서 HTJDTLD는 효과적인 항고혈압 효과를 보였는데, 이는 소포체(ER) 스트레스 유발 세포자멸사 경로 활성화 억제와 관련이 있을 수 있습니다.
Abstract
혈장 호모시스테인(Hcy) 수치 상승을 특징으로 하는 특정 형태의 고혈압인 H형 고혈압은 전 세계적으로 주요 공중 보건 문제가 되었습니다. 이 연구는 혈관 협착증 치료에 일반적으로 사용되는 매우 효과적인 중국 전통 의학 공식인 Huotan Jiedu Tongluo 달인(HTJDTLD)의 저혈압 효과와 기저 기전을 조사했습니다. 쥐에서 H형 고혈압을 유발하기 위해 메티오닌을 사용하였고, HTJDTLD를 위내로 투여하였다. 그런 다음, 쥐의 꼬리 동맥의 수축기 및 이완기 혈압을 비침습적 쥐 꼬리 압력계로 측정했습니다. 대동맥의 조직학적 평가는 hematoxylin-eosin(HE) 염색에 의해 수행되었습니다. 효소 결합 면역 흡착 분석법(ELISA)을 사용하여 Hcy 수준을 측정하고, 정량적 역전사 효소 중합효소 연쇄 반응(qRT-PCR) 및 웨스턴 블로팅을 사용하여 포도당 조절 단백질 78(GRP78), 종양 괴사 인자(TNF) 수용체 관련 인자 2(TRAF2), c-Jun N-말단 키나아제(JNK) 및 카스파제-3의 mRNA 및 단백질 수준을 측정했습니다. 그 결과, HTJDTLD는 메티오닌 치료 후 혈압을 유의하게 낮추고, 조직병리학적 병변을 완화하며, Hcy 수치를 감소시키는 것으로 나타났습니다. 또한, HTJDTLD는 주로 소포체(ER) 스트레스 유발 세포사멸 경로에 관여하는 GRP78, JNK, TRAF2 및 caspase 3의 유전자 및 단백질 발현을 유의하게 억제했습니다. 전반적으로, 결과는 HTJDTLD가 H형 고혈압이 있는 쥐에서 효과적인 항고혈압 효과를 나타냈으며, ER 스트레스 유발 세포자멸사 경로 활성화 억제와 관련된 항고혈압 기전을 밝혔다.
Introduction
심장마비, 뇌졸중, 신부전의 주요 위험 요인인 고혈압은 전 세계 10억 명의 사람들에게 영향을 미치는 중요한 공중 보건 문제가 되었습니다1. 호모시스테인(Hcy)은 티올기 함유 아미노산으로 메티오닌 대사의 중요한 대사 중개자입니다. 혈장 Hcy 수치가 상승된 고혈압은 H형 고혈압으로 정의되며, 이는 뇌졸중 2,3과 같은 심뇌혈관 질환의 발생 및 재발에 대한 중요한 위험 요인이 될 수 있습니다. 최근 연구에 따르면 H형 고혈압의 동반 거주는 심혈관 및 뇌혈관 질환의 부작용을 악화시킬 수 있다고 보고되었다4. 특히 중국에서 H형 고혈압 환자의 75%가 원발성 고혈압을 앓고 있으며, 이는 삶의 질에 심각한 영향을 미친다5. 현재 H형 고혈압의 치료는 주로 서양 의학을 포함하고 있습니다. 그러나 특정 부작용과 순응도 저하를 유발할 수 있으며 더 이상 H형 고혈압의 종합적인 관리에 대한 요구를 충족시킬 수 없습니다.
중국 전통 의학(TCM)은 중국에서 2,000년 이상의 역사를 가진 독특한 자원입니다. 서양 의학에서 고혈압 조절에 대한 충족되지 않은 요구로 인해 임상의들은 H형 고혈압의 예방 및 치료에서 한의학의 잠재적 역할을 고려하기 시작했다6. Huotan Jiedu Tongluo Decoction (HTJDTLD)은 Yue Deng 교수가 광범위한 임상 전문 지식을 바탕으로 공식화한 중국 전통 의학 공식입니다7. 20년 이상의 임상 적용 과정에서 HTJDTLD는 심혈관 및 뇌혈관 질환 치료에서 놀라운 효과를 입증했습니다1. 그러나 HTJDTLD가 H형 고혈압에 치료 효과가 있는지는 보고되지 않았습니다. 따라서 H형 고혈압 환자에서 HTJDTLD의 항고혈압 효과와 특정 기전을 탐색하고 H형 고혈압 치료를 위한 잠재적 치료 약물을 식별하는 것을 목표로 했습니다.
Protocol
Representative Results
Discussion
고혈압은 성인 인구의 1/3에 영향을 미치는 가장 흔한 심혈관 질환 중 하나이며 뇌졸중, 관상 동맥 심장 질환, 심부 및 신부전의 위험을 증가시킵니다8. H형 고혈압은 원발성 고혈압과 호모시스테인 수치 증가가 동시에 발생하는 특수한 유형의 고혈압으로, 수년 동안 많은 관심을 받아왔다9. 최근에는 항고혈압제와 병용한 경구용 EM의 사용으로 혈압 조절 및 혈중…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
이 연구는 길림성 국립자연과학재단(National Natural Science Foundation of Gillin Province)의 지원을 받았다. YDZJ202301ZYTS189).
Materials
| 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR | Yeasen,China | 11149ES | cDNA synthesis kit |
| Anti-beta-actin antibody | Bioss, China | bs-0061R | |
| Anti-caspase-3 antibody | Bioss, China | bs-0081R | |
| Anti-GPR78 antibody | Abcam, USA | ab108513 | |
| Anti-JNK antibody | Abcam, USA | ab76572 | |
| Anti-p-JNK antibody | Bioss, China | bsm-52462R | |
| Anti-rabbit IgG antibody | Bioss, China | bs-0295G-HRP | |
| Anti-TRAF2 antibody | Bioss, China | bs-22372R | |
| Bio-Rad CFX96 Touch system | Bio-Rad | CFX96 | real-time PCR detection system |
| ECL Western Blot Substrates | Merck, MA, USA | WBULP-10ML | |
| Enalapril maleate folic acid tablets | Yangzijiang Pharmaceutical Company, China | 20040991 | |
| FastStart SYBR Green Master | Sigma | FSSGMMRO | |
| Fructus Trichosanthis | The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China | No catalog number | |
| Hirudo | The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China | No catalog number | |
| intelligent noninvasive sphygmomanometer | Beijing Softron Biotechnology company | BP-2010A | |
| Lonicerae Japonicae Flos | The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China | No catalog number | |
| Methionine | Sigma, USA | M9500 | |
| Radix Angelicae Sinensis | The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China | No catalog number | |
| Radix et Rhizoma Glycyrrhizae | The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China | No catalog number | |
| Radix et Rhizoma Nardostachyos | The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China | No catalog number | |
| Radix et Rhizoma Rhodiolae Crenulatae | The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China | No catalog number | |
| Radix et Rhizoma Salviae Miltiorrhizae | The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China | No catalog number | |
| Radix Scrophulariae | The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China | No catalog number | |
| Rat Hcy ELISA Kits | Shanghai Meimian Industrial Company, China | MM-0293R2 | |
| RIPA buffer | Shanghai Beyotime Biotechnology company | P0013B |
References
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