الآثار الخافضة للضغط وآليات Huotan Jiedu Tongluo ديكوتيون في الفئران مع ارتفاع ضغط الدم من النوع H
Summary
هنا ، نقدم بروتوكولا للحث على ارتفاع ضغط الدم من النوع H وتقييم الآثار الخافضة للضغط من Huotan Jiedu Tongluo ديكوتيون (HTJDTLD) تدار داخل المعدة. في الفئران المصابة بارتفاع ضغط الدم من النوع H ، كان ل HTJDTLD تأثيرات فعالة خافضة للضغط ، ربما ترتبط بتثبيط تنشيط مسار موت الخلايا المبرمج الناجم عن الإجهاد (ER).
Abstract
أصبح ارتفاع ضغط الدم من النوع H ، وهو شكل محدد من ارتفاع ضغط الدم يتميز بارتفاع مستويات الحمض الاميني في البلازما (Hcy) ، تحديا كبيرا للصحة العامة في جميع أنحاء العالم. بحثت هذه الدراسة في التأثيرات الخافضة للضغط والآليات الأساسية ل Huotan Jiedu Tongluo decoction (HTJDTLD) ، وهي تركيبة طبية صينية تقليدية فعالة للغاية تستخدم عادة لعلاج تضيق الأوعية الدموية. تم استخدام الميثيونين للحث على ارتفاع ضغط الدم من النوع H في الفئران ، وتم إعطاء HTJDTLD داخل المعدة. بعد ذلك ، تم قياس ضغط الدم الانقباضي والانبساطي للشريان الذيلي للفئران بواسطة قياس الضغط الذيلي غير الباضع للفئران. تم إجراء التقييم النسيجي للشريان الأورطي عن طريق تلطيخ الهيماتوكسيلين يوزين (HE). تم استخدام مقايسة الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA) لقياس مستويات Hcy ، وتم استخدام تفاعل البوليميراز المتسلسل للنسخ العكسي الكمي (qRT-PCR) والنشاف الغربي لتحديد مستويات mRNA والبروتين للبروتين التنظيمي للجلوكوز 78 (GRP78) ، عامل نخر الورم (TNF) العامل المرتبط بمستقبلات 2 (TRAF2) ، كينازات c-Jun N-terminal (JNK) ، و caspase-3. أظهرت النتائج أن HTJDTLD خفض ضغط الدم بشكل كبير ، وخفف من الآفات النسيجية المرضية ، وخفض مستويات Hcy بعد العلاج بالميثيونين. علاوة على ذلك ، يثبط HTJDTLD بشكل كبير التعبير الجيني والبروتيني ل GRP78 و JNK و TRAF2 و caspase 3 ، والتي تشارك بشكل رئيسي في مسار موت الخلايا المبرمج الناجم عن الإجهاد في الشبكة الإندوبلازمية (ER). بشكل عام ، أشارت النتائج إلى أن HTJDTLD كان له تأثيرات فعالة خافضة للضغط في الفئران المصابة بارتفاع ضغط الدم من النوع H وكشفت عن الآليات الخافضة للضغط المرتبطة بتثبيط تنشيط مسار موت الخلايا المبرمج الناجم عن الإجهاد ER.
Introduction
أصبح ارتفاع ضغط الدم ، وهو عامل خطر رئيسي للنوبات القلبية والسكتة الدماغية والفشل الكلوي ، تحديا كبيرا للصحة العامة يؤثر على مليار شخص في جميع أنحاءالعالم 1. الهوموسيستين (Hcy) ، وهو حمض أميني يحتوي على مجموعة ثيول ، هو وسيط استقلابي حيوي لاستقلاب الميثيونين. يتم تعريف ارتفاع ضغط الدم مع ارتفاع مستويات Hcy في البلازما على أنه ارتفاع ضغط الدم من النوع H ، والذي يمكن أن يكون عامل خطر كبير لحدوث وتكرار أمراض القلب والأوعية الدموية الدماغية مثل السكتة الدماغية 2,3. أفادت الدراسات الحديثة أن الإقامة المشتركة لارتفاع ضغط الدم من النوع H يمكن أن تؤدي إلى تفاقم الآثار الجانبية للأمراض القلبية الوعائية والدماغية4. والجدير بالذكر أن 75٪ من المرضى في الصين الذين يعانون من ارتفاع ضغط الدم من النوع H يعانون من ارتفاع ضغط الدم الأساسي ، مما يؤثر بشكل خطير على نوعية الحياة5. في الوقت الحاضر ، يشمل علاج ارتفاع ضغط الدم من النوع H بشكل رئيسي الطب الغربي. ومع ذلك ، قد يسبب بعض الآثار الضارة وضعف الامتثال ولم يعد بإمكانه تلبية احتياجات الإدارة الشاملة لارتفاع ضغط الدم من النوع H.
الطب الصيني التقليدي (TCM) هو مورد فريد له تاريخ يزيد عن 2000 عام في الصين. نظرا للحاجة غير الملباة للسيطرة على ارتفاع ضغط الدم في الطب الغربي ، بدأ الأطباء في النظر في الدور المحتمل للطب الصيني التقليدي في الوقاية والعلاج من ارتفاع ضغط الدم من النوعH 6. Huotan Jiedu Tongluo Decoction (HTJDTLD) هي صيغة الطب الصيني التقليدي التي صاغها البروفيسور يو دينغ ، مستمدا من خبرته السريرية الواسعة7. على مدار أكثر من 20 عاما من التطبيق السريري ، أظهر HTJDTLD فعالية ملحوظة في علاج أمراض القلب والأوعية الدموية والدماغية1. ومع ذلك ، لم يتم الإبلاغ عما إذا كان HTJDTLD له آثار علاجية في ارتفاع ضغط الدم من النوع H. لذلك ، كنا نهدف إلى استكشاف التأثيرات الخافضة للضغط والآليات المحددة ل HTJDTLD في الفئران المصابة بارتفاع ضغط الدم من النوع H وتحديد الأدوية العلاجية المحتملة لعلاج ارتفاع ضغط الدم من النوع H.
Protocol
Representative Results
Discussion
ارتفاع ضغط الدم هو واحد من أكثر اضطرابات القلب والأوعية الدموية شيوعا التي تؤثر على ثلث السكان البالغين وتزيد من خطر الإصابة بالسكتة الدماغية وأمراض القلب التاجية وفشل القلب والكلى8. ارتفاع ضغط الدم من النوع H هو نوع خاص من ارتفاع ضغط الدم يشير إلى تزامن ارتفاع ضغط الدم الأساس…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
ودعمت هذا العمل المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في مقاطعة جيلين (رقم. YDZJ202301ZYTS189).
Materials
| 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR | Yeasen,China | 11149ES | cDNA synthesis kit |
| Anti-beta-actin antibody | Bioss, China | bs-0061R | |
| Anti-caspase-3 antibody | Bioss, China | bs-0081R | |
| Anti-GPR78 antibody | Abcam, USA | ab108513 | |
| Anti-JNK antibody | Abcam, USA | ab76572 | |
| Anti-p-JNK antibody | Bioss, China | bsm-52462R | |
| Anti-rabbit IgG antibody | Bioss, China | bs-0295G-HRP | |
| Anti-TRAF2 antibody | Bioss, China | bs-22372R | |
| Bio-Rad CFX96 Touch system | Bio-Rad | CFX96 | real-time PCR detection system |
| ECL Western Blot Substrates | Merck, MA, USA | WBULP-10ML | |
| Enalapril maleate folic acid tablets | Yangzijiang Pharmaceutical Company, China | 20040991 | |
| FastStart SYBR Green Master | Sigma | FSSGMMRO | |
| Fructus Trichosanthis | The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China | No catalog number | |
| Hirudo | The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China | No catalog number | |
| intelligent noninvasive sphygmomanometer | Beijing Softron Biotechnology company | BP-2010A | |
| Lonicerae Japonicae Flos | The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China | No catalog number | |
| Methionine | Sigma, USA | M9500 | |
| Radix Angelicae Sinensis | The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China | No catalog number | |
| Radix et Rhizoma Glycyrrhizae | The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China | No catalog number | |
| Radix et Rhizoma Nardostachyos | The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China | No catalog number | |
| Radix et Rhizoma Rhodiolae Crenulatae | The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China | No catalog number | |
| Radix et Rhizoma Salviae Miltiorrhizae | The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China | No catalog number | |
| Radix Scrophulariae | The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China | No catalog number | |
| Rat Hcy ELISA Kits | Shanghai Meimian Industrial Company, China | MM-0293R2 | |
| RIPA buffer | Shanghai Beyotime Biotechnology company | P0013B |
References
- Noone, C., Dwyer, C. P., Murphy, J., Newell, J., Molloy, G. J. Comparative effectiveness of physical activity interventions and antihypertensive pharmacological interventions in reducing blood pressure in people with hypertension: Protocol for a systematic review and network meta-analysis. Syst Rev. 7 (1), 128 (2018).
- Huang, K., Zhang, Z., Huang, S., Jia, Y., Zhang, M., Yun, W. The association between retinal vessel abnormalities and h-type hypertension. BMC Neurol. 21 (1), 6 (2021).
- Tan, Y., Nie, F., Wu, G., Guo, F., Wang, Y., Wang, L. Impact of h-type hypertension on intraplaque neovascularization assessed by contrast-enhanced ultrasound. J Atheroscler Thromb. 29 (4), 492-501 (2022).
- Towfighi, A., Markovic, D., Ovbiagele, B. Pronounced association of elevated serum homocysteine with stroke in subgroups of individuals: A nationwide study. J Neurol Sci. 298 (1-2), 153-157 (2010).
- Zhong, C., et al. High homocysteine and blood pressure related to poor outcome of acute ischemia stroke in Chinese population. Plos One. 9 (9), e107498 (2014).
- Hao, P., Jiang, F., Cheng, J., Ma, L., Zhang, Y., Zhao, Y. Traditional Chinese medicine for cardiovascular disease: Evidence and potential mechanisms. J Am Coll Cardiol. 69 (24), 2952-2966 (2017).
- Tian, T., et al. Huotan Jiedu Tongluo decoction inhibits balloon-injury-induced carotid artery intimal hyperplasia in the rat through the perk-eif2α-atf4 pathway and autophagy mediation. Evid Based Complement Alternat Med. 2021, 5536237 (2021).
- Simko, F., Pechanova, O. Potential roles of melatonin and chronotherapy among the new trends in hypertension treatment. J Pineal Res. 47 (2), 127-133 (2009).
- Li, T., et al. H-type hypertension is a risk factor for cerebral small-vessel disease. BioMed Res Int. 2020, 6498903 (2020).
- Rodrigo, R., Passalacqua, W., Araya, J., Orellana, M., Rivera, G. Homocysteine and essential hypertension. J Clin Pharmacol. 43 (12), 1299-1306 (2003).
- Lehmann, M., Gottfries, C. G., Regland, B. Identification of cognitive impairment in the elderly: Homocysteine is an early marker. Dement Geriatr Cogn. 10 (1), 12-20 (1999).
- dos Santos, E. F., et al. Evidence that folic acid deficiency is a major determinant of hyperhomocysteinemia in Parkinson’s disease. Metab Brain Dis. 24 (2), 257-269 (2009).
- Zhao, W., Gao, F., Lv, L., Chen, X. The interaction of hypertension and homocysteine increases the risk of mortality among middle-aged and older population in the United States. J Hypertens. 40 (2), 254-263 (2022).
- Woo, K. S., et al. Hyperhomocyst(e)inemia is a risk factor for arterial endothelial dysfunction in humans. Circulation. 96 (8), 2542-2544 (1997).
- Lu, F., et al. The intervention of enalapril maleate and folic acid tablet on the expressions of the grp78 and chop and vascular remodeling in the vascular smooth muscle cells of h-hypertensive rats with homocysteine. Eur Rev Med Pharmaco. 22 (7), 2160-2168 (2018).
- López-García, P., Moreira, D. Selective forces for the origin of the eukaryotic nucleus. BioEssays. 28 (5), 525-533 (2006).
- Minamino, T., Komuro, I., Kitakaze, M. Endoplasmic reticulum stress as a therapeutic target in cardiovascular disease. Circ Res. 107 (9), 1071-1082 (2010).
- Chen, X., Cubillos-Ruiz, J. R. Endoplasmic reticulum stress signals in the tumour and its microenvironment. Nat Rev Cancer. 21 (2), 71-88 (2021).
- Ji, C., Kaplowitz, N. Hyperhomocysteinemia, endoplasmic reticulum stress, and alcoholic liver injury. World J Gastroentero. 10 (12), 1699-1708 (2004).
- Zhang, C., et al. Homocysteine induces programmed cell death in human vascular endothelial cells through activation of the unfolded protein response. J Biol Chem. 276 (38), 35867-35874 (2001).
- Cunard, R. Endoplasmic reticulum stress, a driver or an innocent bystander in endothelial dysfunction associated with hypertension. Cur Hypertens Rep. 19 (8), 64 (2017).
- Casas, C. GRP78 at the centre of the stage in cancer and neuroprotection. Front Neurosci. 11, 177 (2017).
- Urano, F., et al. Coupling of stress in the ER to activation of JNK protein kinases by transmembrane protein kinase ire1. Science. 287 (5453), 664-666 (2000).
- Borghi, A., Verstrepen, L., Beyaert, R. TRAF2 multitasking in tnf receptor-induced signaling to nf-κb, map kinases and cell death. Biochem Pharmacol. 116, 1-10 (2016).
- Wen, X. -. R., et al. Butylphthalide suppresses neuronal cells apoptosis and inhibits JNK-caspase3 signaling pathway after brain ischemia /reperfusion in rats. Cell Mol Neurobiol. 36 (7), 1087-1095 (2016).
- Jin, M., et al. Serine-threonine protein kinase activation may be an effective target for reducing neuronal apoptosis after spinal cord injury. Neural Regen Res. 10 (11), 1830-1835 (2015).
- Xu, F., et al. Estrogen and propofol combination therapy inhibits endoplasmic reticulum stress and remarkably attenuates cerebral ischemia-reperfusion injury and ogd injury in hippocampus. Biomed Pharmacother. 108, 1596-1606 (2018).
