ההשפעות והמנגנונים נגד יתר לחץ דם של מרתח Huotan Jiedu Tongluo בחולדות עם יתר לחץ דם מסוג H
Summary
כאן, אנו מציגים פרוטוקול לגרימת יתר לחץ דם מסוג H ולהעריך את ההשפעות נגד יתר לחץ דם של מרתח Huotan Jiedu Tongluo (HTJDTLD) המנוהל תוך גזסטרית. בחולדות עם יתר לחץ דם מסוג H, HTJDTLD היה בעל השפעות יעילות נגד יתר לחץ דם, שייתכן שהיו קשורות לעיכוב של הפעלת מסלול אפופטוזיס הנגרם על ידי לחץ אנדופלסמי (ER).
Abstract
יתר לחץ דם מסוג H, שהוא צורה ספציפית של יתר לחץ דם המאופיין ברמות גבוהות של הומוציסטאין בפלזמה (Hcy), הפך לאתגר גדול בתחום בריאות הציבור ברחבי העולם. מחקר זה בדק את ההשפעות ההיפוטנסיביות ואת המנגנונים הבסיסיים של מרתח Huotan Jiedu Tongluo (HTJDTLD), נוסחה יעילה ביותר ברפואה סינית מסורתית המשמשת בדרך כלל לטיפול בהיצרות כלי דם. מתיונין שימש לגרימת יתר לחץ דם מסוג H בחולדות, ו-HTJDTLD ניתן תוך גסטרית. לאחר מכן, לחץ הדם הסיסטולי והדיאסטולי של העורק הקאודלי של חולדות נמדד על ידי מנומטריה קאודלית לא פולשנית של חולדות. הערכה היסטולוגית של אבי העורקים בוצעה על ידי צביעת hematoxylin-eosin (HE). בדיקת אימונוסורבנט מקושרת אנזים (ELISA) שימשה למדידת רמות Hcy, ותגובת שרשרת כמותית של פולימראז שעתוק לאחור (qRT-PCR) והקרישה המערבית שימשו לקביעת רמות ה-mRNA והחלבון של חלבון מווסת גלוקוז 78 (GRP78), גורם הקשור לקולטן נמק הגידול (TNF) גורם 2 (TRAF2), קינאזות c-Jun N-terminal (JNK) וקספאז-3. התוצאות הראו כי HTJDTLD הוריד באופן משמעותי את לחץ הדם, הקל על נגעים היסטופתולוגיים והוריד את רמות Hcy לאחר טיפול במתיונין. יתר על כן, HTJDTLD עיכב באופן משמעותי את ביטוי הגנים והחלבונים של GRP78, JNK, TRAF2 וקספז 3, המעורבים בעיקר במסלול אפופטוזיס המושרה על ידי לחץ ברשתית האנדופלסמית (ER). בסך הכל, התוצאות הצביעו על כך של- HTJDTLD היו השפעות יעילות נגד יתר לחץ דם בחולדות עם יתר לחץ דם מסוג H וחשפו את המנגנונים נגד יתר לחץ דם הקשורים לעיכוב הפעלת מסלול אפופטוזיס הנגרם על ידי לחץ ב- ER.
Introduction
יתר לחץ דם, גורם סיכון מרכזי להתקף לב, שבץ ואי ספיקת כליות, הפך לאתגר משמעותי בתחום בריאות הציבור המשפיע על מיליארד אנשים ברחבי העולם1. הומוציסטאין (Hcy), חומצת אמינו המכילה קבוצת תיול, היא מתווך מטבולי חיוני של מטבוליזם מתיונין. יתר לחץ דם עם רמות גבוהות של Hcy בפלזמה מוגדר כיתר לחץ דם מסוג H, אשר יכול להיות גורם סיכון משמעותי להתרחשות והישנות של מחלות לב וכלי דם כגון שבץמוחי 2,3. מחקרים אחרונים דיווחו כי תושבות משותפת של יתר לחץ דם מסוג H עלולה להחמיר את תופעות הלוואישל מחלות לב וכלי דם וכלי דם 4. יש לציין כי 75% מהחולים בסין עם יתר לחץ דם מסוג H סובלים מיתר לחץ דם ראשוני, המשפיע קשות על איכות החיים5. כיום, הטיפול ביתר לחץ דם מסוג H כולל בעיקר את הרפואה המערבית. עם זאת, זה עלול לגרום לתופעות לוואי מסוימות תאימות ירודה כבר לא יכול לענות על הצרכים לניהול מקיף של יתר לחץ דם מסוג H.
רפואה סינית מסורתית (TCM) היא משאב ייחודי עם היסטוריה של יותר מ -2,000 שנה בסין. בשל הצורך הבלתי מסופק בשליטה ביתר לחץ דם ברפואה המערבית, רופאים החלו לשקול את התפקיד הפוטנציאלי של TCM במניעה וטיפול ביתר לחץ דם מסוג H6. Huotan Jiedu Tongluo Decoction (HTJDTLD) היא נוסחת רפואה סינית מסורתית שנוסחה על ידי פרופסור יואה דנג, השואבת ממומחיותו הקלינית הנרחבת7. במהלך יותר מ -20 שנות יישום קליני, HTJDTLD הוכיח יעילות יוצאת דופן בטיפול במחלות לב וכלי דם במוח1. עם זאת, לא דווח אם ל- HTJDTLD יש השפעות טיפוליות ביתר לחץ דם מסוג H. לכן, מטרתנו הייתה לחקור את ההשפעות נגד יתר לחץ דם ואת המנגנונים הספציפיים של HTJDTLD בחולדות עם יתר לחץ דם מסוג H ולזהות תרופות טיפוליות פוטנציאליות לטיפול ביתר לחץ דם מסוג H.
Protocol
Representative Results
Discussion
יתר לחץ דם היא אחת מהפרעות הלב וכלי הדם הנפוצות ביותר המשפיעה על שליש מהאוכלוסייה הבוגרת ומעלה את הסיכון לשבץ מוחי, מחלות לב כליליות ואי ספיקת לב וכליות8. יתר לחץ דם מסוג H הוא סוג מיוחד של יתר לחץ דם המתייחס להתרחשות משותפת של יתר לחץ דם ראשוני ורמות הומוציסטאין מוגברות ומשך תש…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
עבודה זו נתמכה על ידי הקרן הלאומית למדעי הטבע של מחוז ג’ילין (לא. YDZJ202301ZYTS189).
Materials
| 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR | Yeasen,China | 11149ES | cDNA synthesis kit |
| Anti-beta-actin antibody | Bioss, China | bs-0061R | |
| Anti-caspase-3 antibody | Bioss, China | bs-0081R | |
| Anti-GPR78 antibody | Abcam, USA | ab108513 | |
| Anti-JNK antibody | Abcam, USA | ab76572 | |
| Anti-p-JNK antibody | Bioss, China | bsm-52462R | |
| Anti-rabbit IgG antibody | Bioss, China | bs-0295G-HRP | |
| Anti-TRAF2 antibody | Bioss, China | bs-22372R | |
| Bio-Rad CFX96 Touch system | Bio-Rad | CFX96 | real-time PCR detection system |
| ECL Western Blot Substrates | Merck, MA, USA | WBULP-10ML | |
| Enalapril maleate folic acid tablets | Yangzijiang Pharmaceutical Company, China | 20040991 | |
| FastStart SYBR Green Master | Sigma | FSSGMMRO | |
| Fructus Trichosanthis | The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China | No catalog number | |
| Hirudo | The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China | No catalog number | |
| intelligent noninvasive sphygmomanometer | Beijing Softron Biotechnology company | BP-2010A | |
| Lonicerae Japonicae Flos | The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China | No catalog number | |
| Methionine | Sigma, USA | M9500 | |
| Radix Angelicae Sinensis | The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China | No catalog number | |
| Radix et Rhizoma Glycyrrhizae | The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China | No catalog number | |
| Radix et Rhizoma Nardostachyos | The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China | No catalog number | |
| Radix et Rhizoma Rhodiolae Crenulatae | The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China | No catalog number | |
| Radix et Rhizoma Salviae Miltiorrhizae | The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China | No catalog number | |
| Radix Scrophulariae | The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China | No catalog number | |
| Rat Hcy ELISA Kits | Shanghai Meimian Industrial Company, China | MM-0293R2 | |
| RIPA buffer | Shanghai Beyotime Biotechnology company | P0013B |
References
- Noone, C., Dwyer, C. P., Murphy, J., Newell, J., Molloy, G. J. Comparative effectiveness of physical activity interventions and antihypertensive pharmacological interventions in reducing blood pressure in people with hypertension: Protocol for a systematic review and network meta-analysis. Syst Rev. 7 (1), 128 (2018).
- Huang, K., Zhang, Z., Huang, S., Jia, Y., Zhang, M., Yun, W. The association between retinal vessel abnormalities and h-type hypertension. BMC Neurol. 21 (1), 6 (2021).
- Tan, Y., Nie, F., Wu, G., Guo, F., Wang, Y., Wang, L. Impact of h-type hypertension on intraplaque neovascularization assessed by contrast-enhanced ultrasound. J Atheroscler Thromb. 29 (4), 492-501 (2022).
- Towfighi, A., Markovic, D., Ovbiagele, B. Pronounced association of elevated serum homocysteine with stroke in subgroups of individuals: A nationwide study. J Neurol Sci. 298 (1-2), 153-157 (2010).
- Zhong, C., et al. High homocysteine and blood pressure related to poor outcome of acute ischemia stroke in Chinese population. Plos One. 9 (9), e107498 (2014).
- Hao, P., Jiang, F., Cheng, J., Ma, L., Zhang, Y., Zhao, Y. Traditional Chinese medicine for cardiovascular disease: Evidence and potential mechanisms. J Am Coll Cardiol. 69 (24), 2952-2966 (2017).
- Tian, T., et al. Huotan Jiedu Tongluo decoction inhibits balloon-injury-induced carotid artery intimal hyperplasia in the rat through the perk-eif2α-atf4 pathway and autophagy mediation. Evid Based Complement Alternat Med. 2021, 5536237 (2021).
- Simko, F., Pechanova, O. Potential roles of melatonin and chronotherapy among the new trends in hypertension treatment. J Pineal Res. 47 (2), 127-133 (2009).
- Li, T., et al. H-type hypertension is a risk factor for cerebral small-vessel disease. BioMed Res Int. 2020, 6498903 (2020).
- Rodrigo, R., Passalacqua, W., Araya, J., Orellana, M., Rivera, G. Homocysteine and essential hypertension. J Clin Pharmacol. 43 (12), 1299-1306 (2003).
- Lehmann, M., Gottfries, C. G., Regland, B. Identification of cognitive impairment in the elderly: Homocysteine is an early marker. Dement Geriatr Cogn. 10 (1), 12-20 (1999).
- dos Santos, E. F., et al. Evidence that folic acid deficiency is a major determinant of hyperhomocysteinemia in Parkinson’s disease. Metab Brain Dis. 24 (2), 257-269 (2009).
- Zhao, W., Gao, F., Lv, L., Chen, X. The interaction of hypertension and homocysteine increases the risk of mortality among middle-aged and older population in the United States. J Hypertens. 40 (2), 254-263 (2022).
- Woo, K. S., et al. Hyperhomocyst(e)inemia is a risk factor for arterial endothelial dysfunction in humans. Circulation. 96 (8), 2542-2544 (1997).
- Lu, F., et al. The intervention of enalapril maleate and folic acid tablet on the expressions of the grp78 and chop and vascular remodeling in the vascular smooth muscle cells of h-hypertensive rats with homocysteine. Eur Rev Med Pharmaco. 22 (7), 2160-2168 (2018).
- López-García, P., Moreira, D. Selective forces for the origin of the eukaryotic nucleus. BioEssays. 28 (5), 525-533 (2006).
- Minamino, T., Komuro, I., Kitakaze, M. Endoplasmic reticulum stress as a therapeutic target in cardiovascular disease. Circ Res. 107 (9), 1071-1082 (2010).
- Chen, X., Cubillos-Ruiz, J. R. Endoplasmic reticulum stress signals in the tumour and its microenvironment. Nat Rev Cancer. 21 (2), 71-88 (2021).
- Ji, C., Kaplowitz, N. Hyperhomocysteinemia, endoplasmic reticulum stress, and alcoholic liver injury. World J Gastroentero. 10 (12), 1699-1708 (2004).
- Zhang, C., et al. Homocysteine induces programmed cell death in human vascular endothelial cells through activation of the unfolded protein response. J Biol Chem. 276 (38), 35867-35874 (2001).
- Cunard, R. Endoplasmic reticulum stress, a driver or an innocent bystander in endothelial dysfunction associated with hypertension. Cur Hypertens Rep. 19 (8), 64 (2017).
- Casas, C. GRP78 at the centre of the stage in cancer and neuroprotection. Front Neurosci. 11, 177 (2017).
- Urano, F., et al. Coupling of stress in the ER to activation of JNK protein kinases by transmembrane protein kinase ire1. Science. 287 (5453), 664-666 (2000).
- Borghi, A., Verstrepen, L., Beyaert, R. TRAF2 multitasking in tnf receptor-induced signaling to nf-κb, map kinases and cell death. Biochem Pharmacol. 116, 1-10 (2016).
- Wen, X. -. R., et al. Butylphthalide suppresses neuronal cells apoptosis and inhibits JNK-caspase3 signaling pathway after brain ischemia /reperfusion in rats. Cell Mol Neurobiol. 36 (7), 1087-1095 (2016).
- Jin, M., et al. Serine-threonine protein kinase activation may be an effective target for reducing neuronal apoptosis after spinal cord injury. Neural Regen Res. 10 (11), 1830-1835 (2015).
- Xu, F., et al. Estrogen and propofol combination therapy inhibits endoplasmic reticulum stress and remarkably attenuates cerebral ischemia-reperfusion injury and ogd injury in hippocampus. Biomed Pharmacother. 108, 1596-1606 (2018).
