眼表面炎症の誘導と関与組織の収集

瞬きするたびに、角膜上に分散した滑らかな涙液膜が補充されます。眼表面上皮は、眼表面上の涙液膜の分布および正しい配向を促進する。ムチンは角膜と結膜の上皮細胞によって提供され、涙腺から来る涙液膜の水性部分を目の表面に配置するのに役立ちます。最後に、MGは、涙液膜^1、2、3の水性部分の蒸発を防ぐ被覆層を作成する脂質を分泌する。このように、すべての眼器官の協調機能は、侵入する病原体や怪我から眼の表面を保護し、痛みや不快感なしに透き通った視力をサポートします。

健康な眼の表面では、眼を流れる分泌物または眼のリウマチがほこり、死んだ上皮細胞、細菌、粘液、および免疫細胞を一掃します。凝集好中球細胞外トラップ(aggNET)は、細胞外クロマチンで構成されるメッシュ状のマトリックスを定式化し、これらの成分を眼のリウマチに取り込みます。AggNETは、炎症誘発性サイトカインおよびケモカインのタンパク質分解によって炎症を解消します⁴。しかし、それらが機能不全になると、これらの異常なアグネットは、COVID-19⁵、胆石⁶、および唾液分泌症⁷の血管閉塞などの疾患の病因を引き起こします。同様に、眼表面のアグネットは保護的な役割を果たし、露出度の高い表面の炎症の解消に貢献します⁸。眼の表面に誇張された形成またはアグネットの欠如のいずれかが、涙液膜の安定性を損なうか、角膜創傷、瘢痕性結膜炎、およびドライアイ疾患を引き起こす可能性があります。例えば、MGの閉塞はドライアイ疾患の主な原因である⁹。AggNETは、MGの管からの脂質分泌の流れを塞ぎ、マイボーム腺機能障害(MGD)を引き起こすことも知られています。aggNETによるMG開口部の鬱血は、眼の表面を包む脂肪液と逆行性の瓶詰め液の不足を引き起こし、腺機能の機能不全と腺房損傷を引き起こします。この機能不全は、涙液膜の蒸発、まぶたの縁の線維化、眼の炎症、および^MG10,11への有害な損傷を引き起こす可能性があります。

ヒトにおけるMGDの病理学的過程を模倣するために、いくつかの動物モデルが長年にわたって開発されてきた。例えば、1歳のC57BL/6マウスは、50歳以上の患者の眼疾患の病理を反映して、ドライアイ疾患(DED)およびMGDに対する加齢に伴う影響の研究に役立っています^12,13,14。さらに、ウサギは薬理学的介入の効果を調査するための適切なモデルである。したがって、ウサギにおけるMGDの誘導は、エピネフリンの局所投与または13-シス-レチノイン酸(イソトレチノイン)の全身導入のいずれかによって報告されています15,16,17,18,19。.

これらの動物モデルは、MGDの病態生理に寄与するさまざまな要因を決定するのに十分でしたが、その利用には制限がありました。例えば、加齢性MGDのマウスモデルは、高齢者のみの要素を解読するのに理想的であり、したがって、ウサギは複数の病態生理学的メカニズムの調査を可能にするため、眼の表面疾患を研究するのに最も適した動物モデルであると考えられました。しかし、眼の表面でタンパク質を検出するための包括的な分析ツールがなく、ウサギゲノムの多くの部分が注釈されていないため、調査には制限されています^20,21。

さらに、ドライアイ疾患の病因を調査するために使用されたこれらの動物モデルは、眼表面の炎症を引き起こす障害の免疫学的アームを分析するための適切な詳細を提供しなかった。したがって、Ryesらによって開発されたMGDのマウスモデルは、マウスのアレルギー性眼疾患とヒトのMGDとの関連を示し、閉塞性^MGD21の原因となる免疫病因を強調しました。このモデルは、アレルギー性眼疾患を、結膜とまぶたに好中球を動員し、MGDと慢性眼の炎症を引き起こすTH17応答に関連付けます²¹。このマウスモデルにおけるMGDおよび眼の炎症の誘導は、進行中の免疫応答によって引き起こされる局所炎症の発生中の上流のイベントを調査するための貴重なツールです²¹。現在のプロトコルは、閉塞性MGDを伴う眼表面の炎症について説明しています。この方法では、マウスを免疫し、2週間後、免疫原を用いて眼の表面に7日間挑戦する。さらに、急性炎症および角膜、結膜、および眼瞼の解剖中に眼の滲出液および関連する眼器官を単離する手順が記載されている。