マウス切除創傷治癒モデルと組織形態学的創傷解析

皮創傷治癒は、連続的に重なる相を有する複雑な生物学的プロセスである。損傷した上皮のバリア機能を回復させるためには、時間的および空間的に調節される細胞および分子プロセスの調整が必要です。第1段階では、炎症、好中球およびマクロファージが創傷に移行し、局所防御および全身防御を動員する^。炎症期に続いて重なり合うのが増殖段階である。線維芽細胞は急速に増殖し、造粒組織に移行し始める。先導端から離れた角化細胞は、前縁の分化された角化細胞が創傷²を再上皮化するために移行するとして、創傷に向かって方向に増殖する。最後に、造粒組織の線維芽細胞がコラーゲンを合成して沈着し始める間に、再造形および成熟相が始まる。新しいマトリックスの改造と組織は、怪我の後に1年まで続^{くことができます 3}.複数の細胞タイプ間のクロストークを伴う重複する事象の複雑さにより、長年の研究にもかかわらず、創傷治癒の根底にある細胞および分子メカニズムの多くは十分に理解されていない。

マウスモデルは、使用の容易さ、比較的低コスト、遺伝的操作性^1、4、5による創傷治癒のメカニズムを調査するための主要な哺乳類モデル^である。マウスモデルには異なるタイプの創傷が記載されているが、最も一般的なのは切除創傷(両側性パンチまたは直接パンチ生検のいずれか)であり、続いて切開創傷モデル⁴が続く。切除創傷モデルは、癒しのプロセスを経ていない制御組織を本質的に生成するため、切開モデルに対して明確な利点があります。外科プロトコルの一部として切除されるパンチ生検組織は、傷ついた組織と同様に処理し、所望の基準のための恒食状態を確立するために使用することができる。切除された対照組織は、皮膚前処理の効果を評価する場合や、傷害^時に遺伝子改変が成功したことを確認する場合にも有用である。

治癒パラメータは、平面測定やヒストロジーを含む多くの異なる技術によって評価することができる。しかし、プラニメトリーは創傷の目に見える特性しか評価できないし、また、かさぶたの存在のために、しばしば、占いが可視化される治癒の測定値と相関しない、それによって、構造学を分析⁴の「ゴールドスタンダード」にする。組織学的分析はゴールドスタンダードであるにもかかわらず、最も頻繁に創傷の任意のサブセット^6,7で行われる。例えば、創傷を埋め込み、切断する前に「半分」に創傷を切断することは、材料の切断およびデータ分析に費やされる時間とリソースを削減するために現在一般的な習慣である。このプロトコルに記載された形態測定解析の方法は、創傷組織全体を包含し、創傷の形態学的特徴を正確に反映し、小さな効果サイズで創傷治癒欠陥を検出する可能性を高めるために開発された。このプロトコルでは、最も一般的に研究されているマウス創傷、両側の完全な厚さの切除傷を生成するための外科的方法、ならびにそのような組織学的分析のための詳細かつ厳格な方法が現場ではほとんど使用されない。