Induite cellules souches pluripotentes génération de cellules sanguines utilisant Sendai Virus et Centrifugation

Les cellules souches ont été l' un des matériaux les plus attrayants de la thérapie clinique depuis plusieurs décennies ^1. Les propriétés intéressantes de cellules souches sont pluripotence et la capacité d'auto-renouvellement. En 1981, les premières cellules souches embryonnaires (CSE) ont été isolées à partir de l'embryon de souris ^2. Cependant, quand la technique a été appliquée à des embryons humains, il fait face à plusieurs questions éthiques.

En 2006, lorsque le Dr Yamanaka et son équipe reprogrammées la première cellule pluripotente à partir de cellules somatiques de souris, le champ de cellules souches a retrouvé sa possibilité et l' intérêt a été ravivé ^3. En fournissant plusieurs facteurs définis, les cellules souches pluripotentes ont été avec succès "induits" à partir de cellules somatiques adultes, et ont donc été nommés «cellules souches pluripotentes induites (CSPi)." En 2007, cette technique a été appliquée à des cellules humaines ^4, ce qui donne des cellules avec les caractéristiques exactes des CES , mais aucun du débat éthique. Théoriquement, iPSCs peut être générée à partir de tout type de cellule obtenue à partir de tout individu ou patient. CSPi spécifiques des patients sont en hausse comme un outil potentiel qui peut simuler les phénotypes de la maladie et les conditions épigénétiques de chaque patient. En utilisant la modification génétique ou d' autres procédés qui peuvent inverser l'état pathogène, iPSCs spécifiques à un patient peuvent également être utilisés en médecine personnalisée ^5. En outre, iPSCs sont moins associée à un rejet immunitaire parce qu'ils ont la même identité immunitaire du donneur, ce qui rend l' auto-transplantation plus réalisable ^6. Par conséquent, CSPi sont devenus la plate-forme la plus prometteuse dans la modélisation de la maladie, le dépistage des drogues et des thérapies régénératrices. Compte tenu de ces avantages, les protocoles améliorés qui peuvent donner plus purs et des rendements plus élevés dans le moins de temps à partir de la source de cellules plus petites sont constamment en cours de développement. Une considération majeure de trouver le protocole le plus efficace pour l'application future est le type de cellules primaires. La plupart des premières générations proto iPSCcols sont optimisés pour les cellules adhérentes puisque les lignes iPSC originales ont été induites à partir de fibroblastes de la peau ^4. Cependant, l'isolement et la préparation de ces cellules sont main-d'œuvre. En outre, l'isolement des fibroblastes de peau comprend des interventions chirurgicales invasives qui peuvent devenir un défaut majeur pour une application plus large.

Par conséquent, pour l'utilisation ultérieure de iPSCs, une source de cellules à l'acquisition pratique est nécessaire. Le sang est considéré comme une source de cellules idéale car elle est obtenue par le biais d' une procédure minimalement invasive et non ^09/07. Dans cette étude, nous avons développé une simple modification au protocole générant hiPSCs à partir de cellules mononucléaires du sang périphérique (CMSP). Sans que le processus d'expansion difficile d'un type cellulaire spécifique, telles que les cellules CD34 +, les cellules du sang entier ou en série PBMC ont été étalées sur des plaques de matrice revêtu par centrifugation après transduction avec le virus Sendai contenant des facteurs Yamanaka. Cette méthode réduit le temps nécessaire à lafixation des cellules flottantes transduites et une diminution de la perte de cellules reprogrammées qui ne sont pas en mesure de joindre leur propre chef.