ヒト心臓組織からの血管周囲多能前駆細胞集団の単離

心臓は長い有糸分裂後の臓器と考えられてきました。しかし、最近の研究では、成人の心臓¹で制限された心筋細胞のターンオーバーの存在を実証しました。心筋細胞の分化能を持つネイティブ幹/前駆細胞はまた、cardiosphere形成、SCA-1 ^+、c-キット⁺を含め、大人の齧歯動物と人間の心の中に心筋内で同定され、そして最近でてきた、血管周囲の前駆細胞^2,3。これらの細胞は、細胞移植またはインサイチュ増殖の刺激を介して心臓の修復/再生を増強することを目的とした治療のための魅力的な候補を表します。

間葉系幹/間質細胞（MSC）は、MSCの治療適用の^4,5臨床試験は、心血管修復^6、移植片対宿主病⁷のような複数の病理学的条件のために行われているほとんどすべてのヒト組織から単離されています</sup>、および肝硬変^8。有益な効果は、へのMSCの能力に起因している：炎症⁹のサイトへの家。異なる細胞型¹⁰に分化。プロ修復分子^11を分泌^します 。そして、宿主免疫応答^12を調節^します 。 MSCの単離は、伝統的に、プラスチック基板への優先的な遵守に依存してきました。しかし、得られた細胞の集団は、一般的に¹³著しく不均一です。から（ ^– / CD34 ^– / CD45 ^– / ^– CD56 CD146 ⁺ / CD31）キーの血管周囲細胞マーカーの組み合わせで選別（FACS）、蛍光活性化細胞を使用することにより、我々は、多能MSCのような前駆体集団を単離および精製することができました大人の骨格筋や白色脂肪¹⁴を含む複数のヒト組織。

様々な非心臓組織における血管周囲の細胞集団は、幹細胞/前駆細胞の特性を有することが示されていますNDは、心血管の設定で臨床使用のために検討されています。周皮細胞、最もよく知られている血管周囲細胞サブセットの一つは、新しい血管¹⁵の開発を含むいくつかの病態生理学的役割を果たして不均一な集団であり、血圧^16、及び血管の完全^17,18の維持の調節。複数の組織に示すように、周皮細胞の特定のサブセットは、ネイティブMSC抗原を発現し、FACS精製後に¹⁴初代培養でのMSCのような表現型を維持します。また、これらの細胞を安定に培養内での長期的な表現型を維持したMSC ^19,20と同様の多系列分化能を示します。これらの結果は、周皮細胞は、とらえどころのないMSC ¹⁴の起源の一つであることを示唆しています。周皮細胞の治療可能性は、虚血負傷者への移植後の心筋瘢痕化および強化された心機能の低下と実証されています心^21。最近、我々は成功し、ヒト心筋から周皮細胞を精製し、骨格筋形成³の不在で、そのMSCのような表現型および多分化（脂肪生成、軟骨形成および骨形成）を実証しました。また、心筋周皮細胞が他の臓器から精製されたカウンターパートと比較した場合、差動心筋電位と血管新生能力を示しました。

多能血管周囲の幹/前駆細胞、外膜細胞の第二集団は、陽性のCD34発現²²に基づいて、ヒト伏在静脈から単離されています。静脈外膜細胞はクローン原性ポテンシャル、中胚葉分化能およびインビトロでの血管新生促進の可能性を有することが示されています。マウスの虚血損傷した心臓へのこれらの細胞の移植は、間質性線維症の減少、血管新生および心筋の血流の増加、減少、心室DILをもたらしエーション、および増加した心臓の駆出率^23。興味深いことに、脂肪外膜細胞が刺激²⁴と周皮細胞の表現型の採用を示唆し、CD34発現を失い、アンジオポエチンII処理に応答して、培養中のCD146の発現をアップレギュレートすることが示されています。心臓内、しかし、外膜の細胞集団は、まだ前向きにFACSにより精製および/または十分に特徴付けられていません。次のセクションで説明した細胞単離手順を用いて、我々は現在、心筋外膜細胞を特徴付けると再生アプリケーションのための彼らの可能性を調査しています。

ここで我々は、ヒト胎児または成人の心筋から血管周囲の幹/前駆細胞の2亜集団を分離し、精製するための方法について説明します。この前向き細胞単離方法は、比較研究やfurtheのためのヒト心臓生検から同質遺伝子血管周囲の幹/前駆細胞サブセットを取得するために研究者を可能にしますrの様々な心臓の病的状態におけるそれらの治療の可能性を探ります。