Sinir Yanıtları Kayıt ve Tarayıcıları enjekte için bir Awake Fare hazırlanması
Summary
Nöronal yanıtların Elektrofizyolojik karakterizasyonu beyin fonksiyonu anlamak için ve yol izleme için boyaların yerleştirme yönlendirmek için önemlidir. Bununla birlikte, birçok çalışma anestetize hayvanlarda gerçekleştirilir. Anestezi olmadan beyin fonksiyonu anlamak için, nöronal yanıtı özellikleri kaydetmek ve uyanık fare boya enjekte etmek için bir yöntem geliştirdi.
Abstract
Biliyorsunuz anestezi, beynin çeşitli bölgelerinde nöral cevabı özelliklerini değiştirir olduğu bilinmektedir. 13. Işitme sistemi olarak, eşik, frekans özgüllük ve inhibitör sidebands dahil olmak üzere beyin sapı nöronları temel yanıtı özellikleri anestezi altında 1-2 belirgin şekilde değişmiş. Bu gözlemler fizyolojistleri anestezi kirletici etkisi olmayan tek nöronlardan kaydetmek için yollar aramaya sevk etti. Bir sonuç beyin sapı tamamen Ortabeyin 4 seviyesinde transeksiyon bir decerebrate hazırlanması, idi. Bu hazırlık sakıncaları müthiş bir ameliyat, ön beyin gelen projeksiyonlar inen ortadan kaldırılması ve orta beyin yukarıdaki yapıları incelemek için duyusal stimülasyon kullanmak için bir yetersizlik vardır. Farklı bir stratejiye hayvan uyanık ve / veya 5,6 davranışlar ise tek nöronlar ve multiunit kümelerden kaydetmek için kronik elektrod dizileri implant olmuştur </sup>. Bu teknikler Bununla beraber ilk elektrofizyolojik bir beyin yapısını karakterize sonra izleyici boya enjekte ile uyumlu değildir. Tek nöronlardan gelen elektrofizyolojik yanıt özellikleri kaydederken anestezi ile nöral yanıt özelliklerinin değişmesini önlemek için, biz uzun fare 10-12 yarasalar 7-9 kullanılan bir kafalık tekniği adapte var. Bu yöntemi kullanarak, biz unanesthetized farenin birkaç gün içinde elektrofizyolojik yapabiliyoruz. Kayıt seansları sonunda, biz sonra elektrot pozisyonları ve kayıt siteleri yeniden ya ve kayıt lokus gelen yolları tespit edilebilir, böylece bir izleyici enjekte etmek için bir boya enjekte edebilir. Bu yöntem kullanımı anestezi olmadan birden fazla gün boyunca iyi izole tek nöron kayıtları için izin verir.
Protocol
Discussion
Fare elektrofizyolojik ve nöroanatomik deneyler için kafa sonrası koltuk sisteminin avantajı deneyler anestetik ilaçlara bağlı olası cevabı kirliliği ortadan kaldırarak, unanesthetized, uyanık fare ile yapılabilir olmasıdır. Buna ek olarak, bir kümesini daha verimli bir hayvan kullanım için izin vermek için birden çok gün boyunca kullanılabilir.
Kafa-sonrası için en bileşenleri off-the-raf mevcuttur. Sadece baş-sonrası ve montaj aparatları ısmarlama olduğu, inş…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
NSF hibe 0920060, NIH hibe DC004395, NHMRC hibe 1.009.482, Bilim ve Tıp Araştırmaları NSW ve Garnett Passe ve Rodney Williams Memorial Foundation tarafından desteklenmektedir.
Materials
| Name | Company | Catalogue number | Comments |
| Etch gel for cleaning skull prior to dental cement | Henry Schein | 101-5396 | 12/pk with 1.2 mL syringes |
| Primer for dental cement | Kerr Optibond | 25881 | 8 mL bottle |
| Adhesive for dental cement | Kerr Optibond | 25882 | 8 mL bottle |
| Applicators for dental cement | Kerr Optibond | 24680 | 200/pk |
| Dental Cement | Charisma, Heraeus Kulzer | 66000085 | 4gm Syringe Refill |
| Tungsten Rod (Ground Pin) | A-M Systems | 717200 | 0.010″ diameter |
| Economy UV Curing Light | Henry Schein | CU-80 | |
| Head-post | Built in-house | ||
| Mounting bar | Built in-house | ||
| Mounting block | Built in-house | ||
| Stereotaxic Frame | David Kopf Instruments | 902 | |
| Mouse and Neonatal Rat Adaptor | Stoelting | 51625 | |
| Deltaphase Isothermal Pad | Braintree Scientific, Inc. | 39DP |
References
- Evans, E. F., Nelson, P. G. The responses of single neurones in the cochlear nucleus of the cat as a function of their location and the anaesthetic state. Exp. Brain Res. 17, 402-427 (1973).
- Joris, P. X. Response classes in the dorsal cochlear nucleus and its output tract in the chloralose-anesthetized cat. J. Neurosci. 18, 3955-3966 (1998).
- Populin, L. C. Anesthetics change the excitation/inhibition balance that governs sensory processing in the cat superior colliculus. J. Neurosci. 25, 5903-5914 (2005).
- Young, E. D., Brownell, W. E. Responses to tones and noise of single cells in dorsal cochlear nucleus of unanesthetized cats. J. Neurophysiol. 39, 282-300 (1976).
- Donoghue, J. P. Contrasting properties of neurons in two parts of the primary motor cortex of the awake rat. Brain Res. , 333-3173 (1985).
- Westby, G. W., Wang, H. A floating microwire technique for multichannel chronic neural recording and stimulation in the awake freely moving rat. J. Neurosci. Methods. 76, 123-133 (1997).
- Suga, N., O’Neill, W. E., Manabe, T. Cortical neurons sensitive to combinations of information-bearing elements of biosonar signals in the mustache bat. Science. 200, 778-781 (1978).
- O’Neill, W. E., Suga, N. Target range-sensitive neurons in the auditory cortex of the mustache bat. Science. 203, 69-73 (1979).
- Suga, N., O’Neill, W. E., Manabe, T. Harmonic-sensitive neurons in the auditory cortex of the mustache bat. Science. 203, 270-274 (1979).
- Portfors, C. V., Felix, R. A. 2nd Spectral integration in the inferior colliculus of the CBA/CaJ mouse. Neuroscience. , 136-1159 (2005).
- Felix, R. A., Portfors, C. V. Excitatory, inhibitory and facilitatory frequency response areas in the inferior colliculus of hearing impaired mice. Hear Res. 228, 212-229 (2007).
- Portfors, C. V., Jonson, K. G., Roberts, P. D. Over-representation of species-specific vocalizations in the awake mouse inferior colliculus. Neuroscience. 162, 486-500 (2009).
- Franklin, K. B. J., Paxinos, G. . The Mouse Brain in Stereotaxic Coordinates. , (2007).
