Руководство Сдержанность и соединение Общие пути введения у мышей и крыс

1. Безопасный Сдержанность и бережное обращение с животными является ключевой частью экспериментальной процедуры Это видео предназначено, чтобы быть дополнением к практической подготовки предоставляемые вашей организации. Всегда будьте уверены, что IACUC или комитет по этике утверждения на месте перед началом любого эксперимента. Каждый человек, работающий по протоколу должны знать подробности процедур, утвержденных для этого протокола, и любые другие, на которых они работают. Подойдите к грызуна с уверенностью и обращаться с животными мягко, но твердо. Оба слишком грубого обращения и предварительные подходы могут привести укусы или царапины на обработчик или травмы животного. При обращении с животными, всегда есть возможность случайного высвобождения или животного, упал. Большинство этих манипуляций лучше всего выполнять в течение рабочей поверхности, так что если животное упало или убегает, он не пострадал и может быть легко пойманы. Следуйте за своим институтовинституционального политики в отношении животных, которые контактируют с полом. Никогда не берите животных на кончике хвоста, так как это может привести к травме скальпирующий хвоста. Будьте особенно осторожны с большими крысами или беременных мышей. Всегда используйте другой стороны, чтобы поддерживать тело, как вы поднимите за хвост. Sharp иглы работают лучше, когда делают инъекции. Несмотря на то, иглы для лабораторных грызунов иногда используются для многократных инъекций, это не рекомендуется по ряду причин, последним из которых является то, что небольшие калибровочных часто используется означает, что иглы скучно быстро. Укуса или царапины всегда есть возможность при работе с животными. При работе с веществом или инфекционных агентов, которые могут привести к травмированию людей, принять дополнительные меры предосторожности, такие манипуляции животных или агентов в вытяжных шкафах или биобезопасности. Нежные подходы и акклиматизации к обработке, прежде чем процедура может окупиться в животных, которые меньше подвержены стрессу на обработку. Практика ограничения, прежде чем соединение администрации, и на практике управляющие веществ для контроля животных, прежде чем подопытных животных. Практикуя эти методы регулярно внушает доверие и уверенность приводит к лучшей управляемости, меньше подвержены стрессу животных, а лучшие научные результаты. При любой обработке технику, если животное непокорных, попробуйте другую технику. Животных (и обработчик) могут также извлечь выгоду от сдачи животных обратно в клетку и пытается еще раз позже. 2. Руководство Restraint Одной рукой мышь сдержанности Поднимите мышь основания хвоста и поместите его на крышку клетки, заготовки для проволоки клетку сверху, или аналогичной шероховатой поверхностью. Одной рукой сдержанность мыши обычно выполняется с не доминирующей рукой, оставляя доминирующей руки свободны для использования. Альтернативный метод позволяет техническим специалистам использовать свой халат или равномерное покрытие рукава предплечье в положениеживотных до сдержанность. Подверните основания хвоста между 3-м и 4-го пальцев, в то время как осторожно потянув назад на хвосте. Это приведет к мыши, чтобы понять поверхности всеми четырьмя лапами и тянуть вперед. Не беритесь мышей, кончик хвоста, особенно если приостановление всей их вес их хвост. Это может привести к скальпированная рана, в которой кожи хвоста соскальзывает. Далее, крепко возьмитесь за мышь за шкирку с той же руки, которая держит хвост. Возьмите с указательным и большим пальцами у основания головы и расширить понимание вниз по спине мыши путем включения в средний и безымянный пальцы. Будьте уверены, чтобы применить достаточно давления или твердости, чтобы кожа вокруг шеи, чтобы предотвратить мыши с поворотом или скручиванием из сдержанность, но не тяните кожу так сильно, что животное не может дышать. Контроль за голову имеет решающее значение. ЕслиМышь может двигать головой, она может достигать пальцы проводника и может укусить. Это может произойти, когда начинающий обработчики схватить мышью слишком далеко вниз по спине, а не прямо позади черепа. Мышь сдержанность двуручный Поднимите мышь основания хвоста и место на клетке крышки, крышка заготовки для проволоки, или шероховатой поверхностью. Альтернативный метод позволяет техническим специалистам использовать свой халат или равномерное покрытие рукава предплечье в положение животного до сдержанность. Осторожно потяните назад на хвосте и мышь поймет поверхность с четырьмя лапами и тянуть вперед. Далее, с другой стороны быстро и крепко возьмитесь за мышь шиворот (см. одной рукой сдержанность выше). С хвостом в одной руке и за шкирку в другой, поднять мышь и уложить основание хвоста между ладонью и 3-го или 4-го пальца руки, держащей за шкирку. Как с одной рукой методом, крепко возьмитесь за шкирку, чтобы предотвратить мышь от скручивания или поворота при этом не захватывая так прочно, что животное не может дышать. Если мышь устойчивы к scruffing, мягкое давление на спине мыши может позволить руке двигаться вверх для лучшего понимания. Крысы сдержанность; scruffing Крысы scruffing обычно выполняется двумя руками и только в небольших крыс. Это не часто используемый метод, потому что крысы являются менее принятие в scruffing, чем у мышей, но это полезно в некоторых ситуациях для сбора крови. Возьмите крысу за хвост с не доминирующей рукой и осторожно потяните назад на шероховатой поверхности (как описано выше для мышей). Будьте осторожны, чтобы понять, у основания хвоста, а хвост кожу крысы могут оторваться, если захватили вблизи острия. Держите хвост крепко в руке и подходить к загривок крысы с тыла. Для exampле, если хвост крысы в ​​левой руке обработчиков, не подходят Крыса от носа до шкирку его с правой руки. Вместо этого, достигать более левую руку, и подходить за шкирку сзади. Применить мягкое давление на заднюю часть крысы, над лопатками, затем возьмитесь за шкирку близко к основанию черепа между пальцами и ладонью. Контроль за голову важно для предотвращения укусов. Крысы укусы могут привести к серьезным травмам. Крысы могут озвучить, когда сдержан в этой моде. Крысы сдержанность; через плечо рукоятки Возьмите крысу за хвост с доминирующей рукой и осторожно потяните назад на шероховатой поверхности (как описано выше для мышей). Альтернативный метод позволяет техническим специалистам использовать свой халат или равномерное покрытие рукава предплечье в положение животного до сдержанность. Будьте осторожны, чтобы понять, у основания хвоста, а хвост крысы кожа окп оторваться, если захватили вблизи острия. Поместите не доминантной рукой по спине крысы, приближающихся сзади. Возьмитесь за крысой вокруг грудной клетки с безымянным пальцем, мизинцем и большим пальцем. Голова крысы должны быть между указательным и средним пальцами. Не сжимать грудную клетку. Крыса может быть проведена таким образом, с одной стороны, если тело стабилизирована против обработчик. Крысы сдержанность; под властью плечи Возьмите крысу за хвост с доминирующей рукой и осторожно потяните назад на шероховатой поверхности (как описано выше для мышей). Альтернативный метод позволяет техническим специалистам использовать свой халат или равномерное покрытие рукава предплечье в положение животного до сдержанность. Будьте осторожны, чтобы понять, у основания хвоста, а хвост кожу крысы могут оторваться, если захватили вблизи острия. Поместите не доминантной рукой за тна спине, приближающихся сзади. Возьмитесь за крысой вокруг грудной клетки, прямо под лопатками. Предплечья крысы должны быть аккуратно толкнул вверх большим пальцем и указательным пальцем. Предплечья должны пересекаться под подбородком крысы, предотвращая его от укусов. Не сжимать грудную клетку. Крыса может быть проведена таким образом, с одной стороны, если тело стабилизирована против обработчик. Decapicone Decapicone является гибким, конусообразный кусок тонкого пластика с отверстием в одном конце. Отверстие достаточно мала, так что мышь или крыса может получить свой нос из норы, но не остальные части тела. Чтобы удержать животное, поместить мышь или крыса в Decapicone соответствующего размера. Нажмите на животное вперед, пока ее нос выступает из отверстия в Decapicone. Либо держать сумку закрытой вокруг хвоста, или использовать поворот галстука, чтобы запечатать животных в конусе. ВыгодноеGE из Decapicone в том, что тонкий пластик позволяет инъекции через материал. Недостатком является то, что материал не дышит и животные могут перегреться. Только держать животных в Decapicone так долго, как это требуется для выполнения процедуры. Акриловые / жесткий пластик фиксатор Пластиковые устройства сдержанность особенно полезны, когда хвост животного должны быть доступны. Они могут быть куплены коммерческой или сделаны в лаборатории. Размер должен быть соответствующий, чтобы животное могло быть ограничены – животное не должно быть в состоянии развернуться в сдержанности. Поместите животных в удерживающего устройства, сначала мягко сдерживать животное, то отпуская ее, головой вперед, на открытии устройства. Это может помочь направить устройство вверх по клетке, как грызуны часто вскарабкаться на безопасную структуру, как и трубка. Поместите закрытия на конецустройство, будьте осторожны, чтобы не повредить хвост животного, ноги, или яички. Свернуть время, проведенное в restrainers, так как животные могут перегреться. Животные могут быть ограничены другими способами, например, такие, как, обернув в маленькое полотенце, или просто купирования руки над животным. Методы могут быть скорректированы с учетом потребностей животных и работником. Всегда соблюдайте осторожность, чтобы избежать укусов и царапин и обеспечить животное от случайного высвобождения или падения с высоты. 3. Методы соединения администрации Это ни в коем случае не исчерпывающий список и другие маршруты возможны. Этот протокол стремится, чтобы проиллюстрировать наиболее часто используемые маршруты. Другие маршруты могут потребовать анестезии животных и после введения боли. Независимо от способа введения используется, убедитесь, что все материалы готовы, прежде чем сдерживать животные. Водные материалы легче вводить, чем более толстые материалы, такие как нефтяной основед соединений. Всегда вводить толще соединения очень медленно, чтобы избежать выбить иглу от шприца. Общее использование игл и шприцев соображений. Всегда храните и утилизации шприцев и игл должным образом. Если вы новичок в использовании шприцев и игл, практика обращения с шприцем и инъекционным перед тем, как вводить животным. В идеале, вы сможете уверенно управлять шприц и иглу с одной стороны, оставляя другую для сдерживания животных. Твердая рука минимизирует иглы движения, которое сводит к минимуму повреждение тканей. Иглы в точку, конические, вал и ступицу. Шприцы есть совет, баррель, и поршень (рис. 1, б). Иглы размером от датчика и длины. Чем больше калибровочных число, тем меньше игла. Малый иглы очень склонны к притупление (от заусенцев формирования на кончике) и не должна использоваться для прокалывания несколько флаконов (рис. 1 в). Всегда выбирайтекратчайшее иглу, которая будет работать для управления соединением. Игла прикреплена к кончику шприца ступицы. Некоторые шприцы блокировки советы. Всегда убедитесь, что шприц надежно прикреплены к игле. Иглы лучших вставляется в животное со скосом вверх, особенно для внутривенных инъекций. Никогда не Напомним иглы вручную. Это распространенная причина травм от укола иглой. Утилизация игл и шприцев должным образом помечены в контейнеры для острых предметов. Если иглы должны быть резюмировал, устройства доступны (рис. 1 г). Интраназально (IN) Сдерживать животных, как описано выше. С помощью шприца или пипетки, поместить небольшое количество материала для ингаляции в ноздри животного. Следите за материал исчезнуть в ноздри. При необходимости повторите до желаемого объема находится под управлением. Внутримышечно (IM) Сдерживать-йэлектронной животных, как описано выше. Убедитесь, что одной из задних ног животного является бесплатным и стабилизировался на инъекцию. Сдержанность может занять от двух людей. Если животное может ударить во время инъекции, повреждения мышц от иглы приведет. Игла должна быть вставлена ​​перпендикулярно к коже животного. Использование соответствующего размера шприца и иглы, введите иглу примерно на зуб глубокие и вводить материал в четырехглавой мышцы животного (передняя поверхность бедра) или боковой мышечной массы бедра. Не вводить в заднюю мышечную массу как можно повредить седалищный нерв. Если животные будут получать многократные инъекции IM, альтернативный ноги. Внутрибрюшинно (IP) Сдерживать животных, как описано выше. Кончика носа животного на пол, обнажив живот для инъекций. Найдите среднюю линию животного и мысленно разделить на квадранты живота (рис. 2). Нижесекторах, особенно животного нижнем правом квадранте, являются соответствующие сайты для внутрибрюшинного введения. В правом нижнем квадранте выбрана в связи с отсутствием анатомически важных структур. Использование соответствующего размера шприца и иглы, вводят материал в животное. Если животные должны получать повторяющиеся IP инъекций, чередовать места введения. Подкожный (SC, SQ) Сдерживать животных, как описано выше. Животное должно быть ограничено достаточно свободно, так что кожа может быть мобилизованы. Если животные должны быть обработаны обычно после выведения КА, не используйте шкирку (затылок). Вместо этого, используйте кожу на спине или крупу фланга. Если животные будут получать многократные инъекции SC, альтернативные участки инъекции. Возьмитесь за кожей и осторожно потяните его вверх, что делает "палатка". При выполнении инъекций соло, вставить иглу и осторожно тЛОР кожу вверх с иглой, чтобы подтвердить, что игла находится в подкожное пространство. Использование соответствующего размера шприца и иглы, введите иглу в 30-45 градусов в палаточном кожи, и придать материалу. Inject параллельно и от пальцев проведения кожей вверх. Если инъекция успешной, небольшая отечность под кожу будет видно. После инъекции применяются мягкое давление для предотвращения обратного потока материала. Подкожные (ID) Для внутрикожных инъекций, животные часто побрился, так что кожа может быть видно. Сдержанность животных для нескольких внутрикожных инъекций может быть затруднено. В этом случае химическое седации может быть необходимым. Сайты для инъекций ID такие же, как те, для SC. Вставьте соответствующего размера иглы в кожу на 15-30 °. Игла не будет вставлен очень далеко и инъекции должны встретиться с повторнойсопротивления. Альтернативный подход заключается в нежно пощипать кожу, прилегающих к инъекции и вставить иглу в очень небольшим углом. Это полезно в мышей, поскольку она позволяет им перемещаться во время процесса впрыска. Если инъекция успешно, небольшой волдырь будет видно. Это будет бледнее, чем окружающая кожа. После инъекции применяются мягкое давление для предотвращения обратного потока материала. Внутрисосудистых (IV) Левой и правой боковых жилок хвост являются наиболее распространенной сосудистой маршрут доступа, используемые в мышах и крысах. Другие сосудистые подъездные пути возможны у мышей и крыс, но обычно требуют седации и после инъекции боли. Для инъекции вену хвоста, удержать животное в Decapicone или пластиковый фиксатор грызунов. Поместить хвост животного под лампой или на охраняемой устройства потепления. Это будет способствовать расширение кровеносных сосудов, что облегчает инъекцию. Не перегревать животных. Для крупных самцов крыс, очистки кожи масштабах от хвоста может позволить лучше визуализировать вены. Чистка должна быть нежными, чтобы кожа не изнашивается. Держите хвост животного от кончика с не доминирующей рукой. Это будет выпрямить хвост. Поверните хвост ¼ оборота разместить хвост вены сверху для облегчения введения. Животное имеет два боковых жилок хвоста и брюшной артерии хвоста (рис. 3). Подойдите к хвосту с иглой на 15-20 ° угол. Начало в дистальной части хвоста. Вен мелкой и иглы не должен быть вставлен далеко за пределы фаски. Если инъекция началось как дистально возможно, есть более неповрежденной вены, чтобы попытаться инъекции, следует сначала попытаться неудачу. Inject материала. Успешное введение приведет материала, поступающего в вену, несопротивление и побледнение в хвостовую вену в течение всего срока инъекции. Не аспирации перед инъекцией, так как это рухнет вены. Нежное давление на вены сайта после инъекции позволит предотвратить кровотечение. В неудачных инъекций, материал не будет течь легко. Вместо хвоста кожу или побелить материал не может быть введен на всех. Внутрижелудочное администрации (желудочный зонд) Выполнять только через желудочный зонд на сдержанные, бодрствующих животных. Анестезии или седации увеличивает риск аспирации (материал случайно попадание в легкие). Выбор соответствующего размера устной иглу питания для использования. Эти иглы имеют мяч советов в конце, чтобы не допустить их перехода в трахею. Длина необходимости может быть определена путем проведения сдержанной животных и измерения из угла рта. Мяч кончике иглы кормления должна доходить до последнего ребра животного (<сильная> рис. 4). Иглой определяется по весу животного. Сдерживать животное так, чтобы его голова и тело находятся в прямой, вертикальной линии. Это поправляет пищевода, что облегчает прохождение кормления иглы. Вставьте шар кончик иглы в рот животного, над языком. Как только игла находится в месте, довести игл и шприцев, нажатие мягко по отношению к небу, так что нос животного к потолку. У крыс, иглы, возможно, потребуется быть перенаправлены немного, как она проходит в задней части горла. Любое напряжение на игле, указывает на необходимость отрегулировать положение Продолжайте проходить иглу, пока заданное расстояние будет достигнуто. Игла должна проходить легко, и животное не должно задохнуться или подавиться. Администрирование вещества. Она должна поступать в желудок. Если есть сопротивление или животное задыхается, дроссели, или синим цветом, следует немедленно остановить и устранить необходимостьLE. Животные, которые атмосферный может потребовать эвтаназию, в зависимости от вводимого соединения. 4. Представитель Результаты Когда животные обрабатываются корректно, есть как минимум стресса для животных и обработчик. Обработчики не укусить или поцарапать, и животные обрабатываются гуманно и грамотно. Соединения вводят через правильный маршрут с минимальным повреждением тканей и, как небольшой дискомфорт для животных насколько это возможно. Если следователи являются новыми для обработки животных, работая с небольшой чучела животных может быть полезным. Есть также животных тренажеры для некоторых методов, таких как Koken крысы. Для многих исследователей, существует мало шансов, чтобы получить знакомство с иглы и шприцы перед началом работы с животными. Представитель часть игл и шприцев показаны на рисунке 1А и 1В. Перед инъекционных животных в первый раз, онможет быть полезно на практике инъекционного перед началом работы с животными. Очень тонкие иглы, такие как 28 и 30 г, легко ущерб. Если снятие веществ из многофункционального флаконы, использовать большую иглу для этой цели, а затем заменить его на меньшие иглы для инъекций. Burred иглы показано на рисунке 1С. Основные меры предосторожности должны быть приняты при работе с иглами, например, не резюмируя использованные иглы от руки. Рис. 1D показывает иглу recapper в использовании. Это может быть ценной для исследователей, которые необходимо удалить иглы, например, экспресс кровь из шприца без гемолиза видно, когда кровь проталкивается через иглу. Рисунки 2 и 3 иллюстрируют ориентиры для внутрибрюшной инъекции и типичная структура хвоста, иллюстрирующие цели для инъекций. Рисунке 4 приведены примеры надлежащего размера из зонд иглы. Желудочный зонд иглы должна достичь от устьяНимал направо ниже последнего ребра. Рисунок 1.) Иглы и B) частей шприца, маркированы. C) Burr на иглу в результате неоднократного размещения иглы в многофункциональный флаконе. D) иглы recapper в использовании. Рисунок 2. Квадранта брюшной живота. Только вводить в двух нижних секторах, преимущественно правом нижнем квадранте. Рисунок 3. Схема хвост в поперечном сечении, иллюстрирующий отношение артерий и вен в костной и tendenous структур. Рисунок 4. Зонд иглы размера у крыс. A) зонд иглу слишком LONг. B) соответствующего размера зонд иглы. C) зонд иглы измерения слишком коротка, D) пальпации за последние ребра, чтобы определить соответствующий зонд размером иглы. Мышь Крыса Маршрут Рекомендуемый объем Рекомендуемая датчика и длины иглы Рекомендуемый объем Рекомендуемая датчика и длины иглы Интраназальная 1 5-25 мкл N / A 5-25 мкл N / A Внутримышечно 1,2 0,00005 мл / г <23 г, 0,5 до 0,75 В 0,1 мл / кг <21 г, 0,5 до 0,75 В Внутрибрюшинное 1,2 0,02 мл / г <21 г, 0,75 к 1 в 10 мл / кг <21 г, 0,75 к 1 в Подкожный 1,2 0,01 мл / г <22 г, 0,5 к 1 в 5 мл / кг <22 г, 0,5 к 1 в Подкожные 1 0,05-0,1 мл <26 г, 0,5 В 0,05-0,1 мл <26 г, 0,5 В Внутривенно 1,2 0,005 мл / г -0,025 мл / г * <25 г, 0,75 к 1 в 5 ml/kg-20 мл / кг * <23 г, 0,75 к 1 в Желудочный зонд 1,2 0,01 мл / г 20-22 г кормления иглы 5-10 мл / кг 16-20 г кормления иглы * Первое число объеме дается как болюсно в течение примерно 1 минуты. Второй том объеме, который может быть представлен в виде медленной инфузии в течение 5-10 минут. <sЧонг> Таблица 1. Рекомендуемые дозы и иглы размеров для различных путей введения соединения в мышей и крыс.