دليل ضبط النفس وطرق الإدارة المشتركة في مجمع الفئران والجرذان
Summary
العمل بأمان وإنسانية مع القوارض البحث يتطلب الكفاءات الأساسية في أساليب المناولة وضبط النفس. هذه المادة سوف يقدم المبادئ الأساسية اللازمة للتعامل مع بأمان وفعالية إدارة المركبات على الفئران والجرذان.
Abstract
أن تكون قادرة على كبح جماح بأمان وفعالية الفئران والجرذان هو جزء مهم من إجراء البحوث. العمل بثقة وإنسانية مع الفئران والجرذان يتطلب الكفاءة في أساليب التعامل مع الأساسية وضبط النفس. هذه المادة سوف يقدم المبادئ الأساسية اللازمة للتعامل مع الحيوانات بأمان. وسيتم توضيح بيد واحدة، باليدين، وضبط النفس مع الكائنات ضبط النفس المصممة خصيصا. في كثير من الأحيان، وآخر جزء من البحث أو استخدام اختبار الحيوانات هي الإدارة الفعالة للمركبات على الفئران والجرذان. بالرغم من وجود عدد كبير من الطرق الممكنة الإدارة (محدود فقط من حجم وأجهزة الحيوانية)، لا يتم استخدام معظم بانتظام في مجال البحوث. وهذا الفيديو يوضح العديد من الطرق الأكثر شيوعا، بما في ذلك عن طريق الوريد، العضل، تحت الجلد، وبالتزقيم عن طريق الفم. الهدف من هذه المقالة هو لفضح المشاهد غير مألوف مع هذه التقنيات لضبط النفس الأساسية وطرق إدارة المواد المخدرة. هذا الفيديولا يحل محل التدريب العملي على التدريب المطلوب في مرفق الخاص بك، ولكن المقصود لزيادة واستكمال هذا التدريب.
Protocol
Discussion
وينبغي النظر إلى هذا البروتوكول كمقدمة لإدارة والتعامل مع الحيوانات مادة تهدف إلى استكمال التدريب العملي على التدريب المقدم في منشأة الباحث. وسائل ضبط النفس التي سيتم استخدامها وينبغي النظر في طرق إدارة المواد في التصميم التجريبي وعندما يتم كتابة بروتوكول البحث أو الأخلاق بروتوكول اللجنة.
التدريب في الإجراءات المتعلقة بالحيوان هو أمر حيوي لنجاح البحث. لتنفيذ معظم التجارب، لا بد من التعامل معها من قبل موظفي البحوث الحيوانات، وكلما كان ذلك أفضل التعامل مع الحيوانات، وأقل شدد على الحيوان 3. يمكن تعويد الحيوانات على الاتصال البشري لطيف خفض التوتر وتجعل الحيوانات أكثر الموضوعات البحثية لين العريكة 4،5. وقد تبين لمعالجة الإجهاد يؤثر على بعض أنواع البحوث 6 و أنه من الممكن أنها يمكن أن تؤثر الآخرين أيضا. ينبغي أن يتم ضبط النفس من القوارض مع الحذر، ولكن التعامل مع شركة (أ مؤقتقبضة من المرجح أن يؤدي إلى إصابة القوارض ومعالج) وينبغي أن يكون لأقصر مدة العملية. عادة ما يتم اختيار أساليب ضبط النفس استنادا إلى حجم الحيوان أو سعى الوصول. على سبيل المثال، التعامل مع الفئران الكبار من القفا، على الرغم من ذلك ممكنا، وكثيرا ما التقى مع مقاومة قوية من قبل الجرذان، وخاصة إذا كان المعالج هو عديم الخبرة. يمكن عقد الماوس أو الفئران باليد جعل الوصول إلى عروق الذيل صعبة وغالبا ما يتم اختيار جهاز ضبط النفس للحفاظ على الحيوانات بأسرع ما زالت.
عندما تعامل مع الحيوانات الباحثين، انهم يسعون في كثير من الأحيان لإدارة مركب بيولوجي أو لمزيد من الدراسة. يمكن للمسار إدارة المواد تؤثر على الاستيعاب، التوافر البيولوجي، ومدى صلاحيتها للتجربة معينة. يجب الإلمام طرق مختلفة توفر للباحثين لديهم القدرة على إدارة مضمونها في أفضل طريقة ممكنة لأبحاثهم. على سبيل المثال، الطريق الذي يعزز امتصاص السريع للمادةمثل الوريد أو داخل الصفاق، لا ينبغي ان تستخدم اذا كان الباحث يريد أن يقر استخدام هذه المادة بطريقة أبطأ المفعول. ويمكن الاطلاع على المشاركات من بعض هذه التقنيات والاعتبارات لحجم والمعدات والمذاب في ورقتين من تيرنر وآخرون 1،7
كلما المواد هي لأن تدار على القوارض المختبر، ينبغي إيلاء الاعتبار لحجم مناسب من المعدات وحجم مادة (المبينة في الجدول رقم 1). بشكل غير صحيح قد المعدات أو كميات كبيرة الحجم يؤدي إلى عدم الراحة، والإصابة، أو وفاة الحيوان. عموما، تدار المواد المعقمة هي حقنا، إلا إذا كانت أهداف البحث من شأنه أن يجعل هذا الأمر مستحيلا (أي دراسات البكتيرية). يجب أن تكون المركبات والمستحضرات البيولوجية في المذاب أو مركبة التي سيكون لها تأثير أقل على الحيوان. A الرقم الهيدروجيني الفسيولوجية (7.3 -7.4) هو عادة مقبولة تماما، وخاصة بالنسبة تحت الجلد، العضلي، وintraperitoneal الطرق. قد مستويات الحموضة الفسيولوجية في غير المواد التي تديرها هذه الطرق يؤدي إلى الألم أو نخر وتلف الأنسجة. والتسامح أوسع نطاقات درجة الحموضة مع الطرق المعدة والوريد 7. في القوارض الصغيرة، وهناك اعتبار آخر مهم هو إمكانية تقشعر لها الأبدان إذا أعطيت كميات كبيرة من السوائل درجة حرارة الغرفة. إذا سوائل عن طريق الوريد تدار أو الغشاء البريتونى، وخاصة في دعم حيوان سوء، ينبغي أن تكون درجة حرارة درجة حرارة الجسم لأنها (37 ° C).
طرق الإدارة التي تمت مناقشتها في هذا البروتوكول هي تلك التي يشيع استخدامها في العديد من البرامج البحثية، بسيطة لدرجة الماجستير، وعموما لا تتطلب التخدير. طائفة لا حصر لها تقريبا من طرق إدارة ممكنة، ومع ذلك، بما في ذلك، داخل القراب داخل الجمجمة، فوق الجافية، داخل العظم، داخل القصبة الهوائية، وداخل المفصل على سبيل المثال لا الحصر. وينبغي السعي التدريب في هذه الطرق متخصصة في إدارة الناس من ذوي الخوذات البيضاءس ديهم خبرة واسعة مع الطريق ونتائج جيدة.
في القوارض، وعادة ما تستخدم الطريق داخل الأنف لدراسة المواد التي أدخلت على الرئتين عن طريق أكثر "طبيعية"؛ طريقة التقطير داخل القصبة الهوائية من. الفئران والجرذان هي تلزم الأنف الاستراحات، الأمر الذي أدى إلى ذلك يستنشق منها كميات صغيرة جدا من السوائل وليس من الصعب، حتى في الحيوانات واعية. يمكن لأن الغشاء المخاطي للأنف وفرة في المعروض مع الأوعية الدموية، والإدارة داخل الأنف من بعض المواد تكون مشابهة لإدارة الوريد. لا ينصح هذا الطريق في الحيوانات مع التهاب الأنف، لكن، وكما يمكن أن تكون ضارة الاستيعاب. قد محاولات لإدارة كميات كبيرة من الطريق داخل الأنف ضيق التنفس يؤدي إلى الغرق أو الحيوان.
الحقن العضلي توفير المواد سريعة الامتصاص. يمكن أن يكون تحديا الحقن العضلي في الفئران والجرذان بسبب صغر حجمها والعضلات الصغيرة تبعا لذلك. وأدوا في الساق الخلفيةق. نظرا لاحتمال حدوث ضرر من العصب الوركي، والفخذية الرباعية الرؤوس هو العضلات في الاختيار.
على الرغم من أن كلا من تحت الجلد والأدمة الطرق تنطوي على الجلد، وهناك اختلافات بين التوافر البيولوجي للمواد وضعت في الجلد في مقابل تحت الجلد. وغالبا ما يعتبر تحت الجلد الادارة "ترسب" الطريق، مع تباطؤ امتصاص من طرق أخرى، مثل الوريد أو داخل الصفاق. يتم استخدام وحدات التخزين داخل الأدمة إدارة صغيرة جدا من المواد، وعادة المواد مناعة مثل المواد المساعدة مستضد المخاليط. في كلتا الحالتين، يجب أن تكون المواد تدار من درجة الحموضة الفسيولوجية وغير مزعجة. لا ينبغي أن الأدمة تحت الجلد أو الحقن أن يؤديها في القفا، لأن هذا هو موقع يستخدم عادة لتقييد القوارض.
غالبا ما تعتبر الوريد والغشاء البريتوني ما يعادلها في القوارض. طرق الوريد من توفير المزيد من الجرعات صAPID امتصاص مركبات، ومع ذلك، في حين ينبغي النظر تعاطيه في التجويف الجنبي يعادل تقريبا تناوله عن طريق الفم 8. ينبغي الحرص مع الغشاء البريتونى مركبات تدار كما أنها قد تسبب الألم إذا مخزنة بطريقة غير سليمة. الطريق الموحد لإدارة شؤون البلعة في الوريد في القوارض هو عن طريق الأوردة الذيل. إذا هو المطلوب الوريد المزمن لمادة، ينبغي النظر في غرس الوريدي أو الشرياني القنيات. وينبغي تسليم المواد تدار عن طريق الوريد جو معقم و مطهر وينبغي أن تظهر لتكون آمنة لإدارة عن طريق الوريد. على سبيل المثال، والمواد التي ربما تتسبب في انحلال الدم، تخثر الدم، التهاب الأوعية الدموية أو ليست مناسبة للإعطاء في الوريد.
وغالبا ما تستخدم الطريق بالتزقيم المعدة عن طريق الفم أو لتقليد شائع في الطريق الجرعات البشر. كما يسمح لجرعات دقيقة من المواد بالمقارنة مع تناوله عن طريق الفم من خلال الغذاء أو الماء. التوافر البيولوجي للمركباتوسوف تدار من خلال أنبوب تغذية تختلف عن حالة فدان / صام من الحيوان، وكذلك المذاب أو مركبة من المجمع أو البيولوجية. يجب بالتزقيم أو تغذية الإبر يكون من الحجم المناسب للحيوان المستخدمة، ويجب تنظيف بين الحيوانات، إذا الإبر المتاح بالتزقيم ليست عملية. الإصابات الناجمة عن بالتزقيم ليست غير شائعة، وتشمل ترسب هذه المادة في الرئة أو تمزق المعدة أو المريء. وحاول التدريب وأن تكون تحت إشراف من قبل الطرف من ذوي الخبرة والاضطلاع على الحيوانات الموت الرحيم أولا، ثم تخدير الحيوانات (التي سوف يتم التخلص) قبل بالتزقيم على الحيوانات مستيقظا. يجب أن المحاولات الأولى بالتزقيم على الحيوانات مستيقظا إشراك متوسط الحجم الحيوانات وكميات صغيرة من مادة، مثل المالحة، التي من شأنها أن تسبب إصابات لا إذا كان الإجراء يذهب منحرف. وينبغي تقييم الحيوانات عن كثب بحثا عن علامات على الضيق، مثل يلهث، ثم الازرق، والنزيف، أو اللعاب الزائد، والموت الرحيم بعد بالتزقيم إذا لزم الأمر. إذا euthمطلوب انسيا، ينبغي necropsied الحيوان لتحديد سبب فشل الإجراء بالتزقيم.
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
وأيد هذا البحث المقدمة هنا من نهر تشارلز.
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments |
| Needles | Various | Various | Needles are sold by both gauge and length. Check both before ordering. |
| Syringes | Various | Various | Always choose an appropriate size for the volume to be administered. |
| DecapiCones | Braintree Scientific | DC-200, DCL-120, MDC-200 | Available in mouse and rat sizes. |
| Rodent restrainer | Harvard Apparatus, Braintree Scientific, Plas-Labs, others | Available in clear Plexiglas, adjustable plastic, and sized for mice and rats. | |
| 50 ml conical tube | Various | ||
| Feeding needles | VWR, Popper and Sons | Various | Fit the needle gauge and length to the animals as described above. Both disposable and reusable feeding needles are available. |
References
- Turner, P. V., Brabb, T., Pekow, C., Vasbinder, M. A. Administration of substances to laboratory animals: routes of administration and factors to consider. JAALAS. 50, 600-613 (2011).
- Diehl, K. H. A good practice guide to the administration of substances and removal of blood, including routes and volumes. J. Appl. Toxicol. 21, 15-23 (2001).
- Hurst, J. L., West, R. S. Taming anxiety in laboratory mice. Nat. Methods. 7, 825-826 (2010).
- Maurer, B. M., Döring, D., Scheipl, F., Küchenhoff, H., Erhard, M. H. Effects of a gentling programme on the behaviour of laboratory rats towards humans. Appl. Anim. Behav. Sci. 111, 329-341 (2008).
- Cloutier, S., Newberry, R. C. Use of a conditioning technique to reduce stress associated with repeated intra-peritoneal injections in laboratory rats. Appl. Anim. Behav. Sci. 112, 158-173 (2008).
- Romanovsky, A. A., Kulchitsky, V. A., Simons, C. T., Sugimoto, N. Methodology of fever research: why are polyphasic fevers often thought to be biphasic. Am. J. Physiol. 275, 332-338 (1998).
- Turner, P. V., Pekow, C., Vasbinder, M. A., Brabb, T. Administration of substances to laboratory animals: equipment considerations, vehicle selection, and solute preparation. JAALAS. 50, 614-627 (2011).
- Lukas, G., Brindle, S. D., Greengard, P. The route of absorption of intraperitoneally administered compounds. J. Pharmacol. Exp. Ther. 178, 562-564 (1971).
- AALAS. . Laboratory Mouse Handbook. , (2009).
- AALAS. . LAT Training Manual. , (2009).
- AALAS. . LATg Training Manual. , (2009).
- Barnett, S. W. . Manual of Animal Technology. , 440 (2007).
- Baumans, V., Pekow, C. A., Hau, J., Schapiro, S. J. . Handbook of Laboratory Animal Science. 1, 401-446 (2010).
- Bogdanske, J. J., Hubbard-Van Stelle, S., Riley, M. R., Schiffman, B. M. . Laboratory Mouse Procedural Techniques. , (2011).
- Danneman, P., Suckow, M. A., Brayton, C. . The Laboratory Mouse. , (2000).
- Sharp, P. E., La Regina, M. C. . The Laboratory Rat. , (1998).
