Fare Geleneksel NASA Hindlimb Boşaltma Model bir Alternant Yöntemi

Ön-Cerrahi Aletler / Malzeme Tel kesiciler / pense Tül 2 x 2 "pedleri Isıtma yastığı Gümüş nitrat çubukları Steril cerrahi eldiven İsofluranın inhalasyon anestezik Klorheksidin glukonat% 4 (antiseptik cerrahi fırçalayın) Steril 2-0 cerrahi çelik sütür 25 X 5 / 8 iğne (otoklavlı) Hemostat (otoklavlı) Cerrahi çelik sütür Cerrahi Prosedür Steril bir alan oluşturun. Steril prosedürü takip edin. 2 ile fare anestezi -% 3 izofluran. Fare ısıtma yastığı yerleştirin. Klorheksidin çözümü ile kuyruk fırçalayın. Bulun 5, 6 ve 7 inci intervertebral mesafe (kuyruk iki kemik diken diken arasında, kuyruk dibinde, vücut saç sonundan itibaren saymaya başlayın). Intervertebral uzaya iki omurları arasında bir pilot delik Hemostat ve 25G iğne kullanın. 10 cm uzunluğunda çelik sütür kesmek için tel kesiciler kullanın. İğneyi çıkarın ve kuyruk iki ucunda delik, 5 cm dikiş ile çelik sütür eklemek. Kuyruk her tarafında dikiş + 5 cm olmalıdır. Başparmak ucu kuyruk üzerine yerleştirin. Serbest el ve baş parmağınızın ucuna çelik sütür rüzgar ve biter büyük bir döngü oluşturacak şekilde bükün. Yara veya dairesel kısmında uzun + 3 mm olmalıdır. Baş parmağınızla çıkarın. Hemostat ile sütür bir iplikçik Kelepçe ve daha küçük bir döngü, orijinal büyük bir döngü büküm mümkün olduğunca yakından bağlı olduğu sonuna doğru eğip. Fazla tel kesti ve bükülmüş tel geri bükün. Herhangi bir aşırı kanama varsa, gümüş nitrat sopalarla onu durduramaz. Hindlimb boşaltma 5-7 gün önce kurtarmak için tek bir evin kafes izofluran ve yerde fare kapatın. Eğer birden fazla fare birlikte ev sahipliği yapmaktadır kuyruk halkaları dolaşmış olsun. 1. Hindlimb Boşaltma işlemi Malzemeler Size 10-24 X 4 makine vidaları, hayvan başına biri. Naylon somunu boyutu 10 – 24, başına bir hayvan. Kelebek somun boyutu 10 X 24, hayvan başına iki. Yıkama boyutu ¼ X 1, hayvan başına iki. Ek bileşenini kanca boyutu # 6, 1-11/16 "ve tek başına hayvan Balıkçılık döner. Bobin Metal dikiş makinesi. Bir hayvan başına. S-şekilli kanca için küçük ataş, hayvan başına Penseler. 2 x 2 "gazlı bez. 2 "siyah kağıt bağlayıcı kelepçeler. Kanal kaset / laboratuvar bant. Kafesin tam uzunlukta biraz ötesine uzanan 1-3/8 "Kaplama oluklu çelik çubuk 50cm x 40cm x 20cm kafes (sıçan kafes). Bükülmüş boru ile su Şişe. Paslanmaz çelik tel, su şişesi destek U-şeklinde. Kafes Kurulum Kanal bant ile bu zamansal aşağı 1-38 "Kaplama oluklu çelik kafesin üstünden bar, ve bant yatırın. 1 kanat somun, makine vida vida, bir çamaşır makinesi takın ve makine vida oluğu oluklu çelik levha ± kafesin kenarından 15 cm ekleyin. Başka bir yıkama ve kanat somun ekleyin. Her iki kanat fındık sıkın, ancak daha sonra ayarlamalar yapmak için gerekli olacak gibi tamamen sıkmayın. Bobin merkezi delikten makine vida yerleştirin. Bobin düşmesini önlemek için, makine vida sonuna kadar naylon somunu sıkın. Bobin serbestçe dönebilen olmalıdır. Balıkçılık döner bobin alt kısmından gelen ek kanca takın. Ataç S şekilli bir kanca oluşturmak için pense kullanın. (Bir kanca formu ataş 2cm Cut). S-şekilli kanca bir ucunu balıkçılık döner delikten sokun ve pense ile kapattı tutam. Kafes yan iç makine vida paralel U-şeklinde bir tel, koyun ve tam bir su şişesi desteklemek için biter bükün. Spicket aşağı bakacak şekilde, ancak alt dokunmadan su şişesi, U-şekilli tel içine yerleştirin. Bu gıda parçalamak kelepçe gücünü engelleyerek, ya da üzerinde aşağı sıkma olduğunu bu yüzden onlar yakın kapatmaya değil. Olduğunu. Onu dışarı düşen bu 3 – 4 adet gıda tutmak için Sadece yeterince gerginlik., 2 "bağlayıcı kelepçe açık bükün Fare burun. Place 3 – 4 adet bağlayıcı kıskaç içine kemirgen chow. Mouse Hindlimb Boşaltma S-şekilli kanca kuyruk halka küçük halka açık ucuna takın. Alt kanat somun sıkma makinesi vida veya gevşeterek fare yüksekliğini ayarlayın. Alt ekstremite ağırlık taşıyan olmamalıdır. Sonra optimum yüksekliği, üst kanat somununu sıkın elde edilir. Fare arka ayaklarında spicket tırmanırlar, böylece su şişesi, ve U-şekilli tel konumlandırın. Kanal bant ile kafesinin yan su şişesi sabitleyin. Fare üzerine tırmanmaya böylece kafesinin altındaki gıda ile bağlayıcı kelepçe yeri; bantlar ile bant aşağı. Birden fazla hayvan hindlimb kafesin diğer tarafta boş ise aynı prosedürü tekrarlayın. House kafes başına iki hayvan alan hayvanların neredeyse birbirine temas böylece. Fare kuyruğu gevşek balık döner üzerine sarmak için 2 X 2 gazlı bez kullanın. Tül kuyruk güvenliği, gazlı bez etrafında sarmak için küçük bir parça bant kullanın. Bu adım, kuyruk ucu ve bu kuyruk olma nekrotik havuzu kan önde gelen, aşağı sarkık kuyruğu önlemek için önemlidir. Kafesine koçanı yataklar küçük bir miktar ekleyin. Fare, bir höyük yatak ve arka ayaklarında yataklar üzerine yüklemeye çalışmayın aksi takdirde çok fazla yatak katmayın. 2. Temsilcisi Sonuçlar: Kuyruk halka HÜ tekniğin başarı kurmak için kuyruk halka ameliyat öncesi ve öncesinde, HU ve kurtarma hayvan vücut ağırlığı ölçülür; tüm gruplarda ve adrenal kitle; soleus kas kütlesi. Deney boyunca farelerin vücut ağırlıkları Şekil 1'de gösterilmiştir. Kuyruklu halka cerrahisi (24.7 ± 3.5g) önce farelerin vücut ağırlıkları kuyruklu halka cerrahisi (24.3 ± 2.9g), HU için önce 5 gün sonra iyileşme anlamlı bir farklılık yoktu. Ayrıca vücut ağırlığının önemli ölçüde 28 gün HU (21.3 + 2.1g), (22.7 ± 1.9g), HÜ, 14 gün sonra hemen düşüş veya 3 gün sonra kurtarma HU (24.0 ± 1.8g). 14 ve 28 gün boyunca HÜ (-6,8% ve% 12) küçük ama anlamlı olmayan bir beden-kitle kaybına rağmen, farelerin öncesi HÜ vücut ağırlıkları tam iyileşme 3 gün sonra kurtarıldı. Gıda tüketimi ayaktan kontrol fareler ve HÜ fareler için Şekil 3'te gösterilmiştir. Ortalama günlük gıda alımı kontrol grubu ile karşılaştırıldığında 28 gün içinde HÜ farelerde farklı değildi. Biz etkili bir HÜ prosedürü (Şekil 2) gösteren 14 ve 28 gün (-39,1% -46,6%) HÜ aşağıdaki önemli soleus kas atrofi gözlemledi. Ayrıca bu atrofi derecesi HÜ 2, 7, 8, 2-4 hafta boyunca beklenen literatür değerleri ile tutarlı. HÜ soleus kitle toparlanmanın ardından 3 gün kontrol değerleri% 74 oranında önemli ölçüde arttı. Kurtarma grubunda soleus kitle HU grupları hem de önemli derecede daha fazla oldu, ama hala ayaktan kontrol hayvanlara göre önemli ölçüde daha az. Adrenal ağırlıkları hayvan stresin bir göstergesi olarak ölçüldü; sağ ve sol böbreküstü bezleri eksize ve tartıldı hem de. Ortalama ağırlıkları kontrolü ve tüm gruplarda HÜ fareler fareler (Şekil 4) için karşılaştırılabilir. Daha önce sıçanlarda HÜ başında hayvan sayısı için başarı oranı süspansiyon cihazların gelmeden HÜ tamamladı hayvan sayısı (kuyruk çekme bant ile çiğneme hayvanlar nedeniyle) ile karşılaştırıldığında göstermiştir 10 oldu 12 Morey Holton tekniği 1. Bu çalışmada, farelerin hiçbiri (n = 54) hiç HÜ döneminin tamamlanmasından önce süspansiyon indi. Ancak, ağır iltihaplı bir kuyruk geliştirilen bir fare oldu. Inflamasyonu belirgin hale gelince, biz iltihaplı alan iyileşmek için izin kuyruk halka kaldırıldı ve daha sonra HÜ süresini tamamlamak için başka bir kuyruk-ring yerleştirilir. Askı aparat çıkıyor, çünkü geçmişte HÜ Morey Holton yöntemi kullanıldığı zaman, biz genellikle 1-2 fare / grup ortadan kaldırmak. Iz halka yöntemi ile yanlışlıkla döneminde, 14 veya 28 gün (n = 54 fare) HÜ HÜ aparat çıkan fareler hiçbir bölüm vardı. Şekil 1. Vücut Ağırlığı Değişimi (± SD). Kısaltmalar: CON: ağırlık taşıyan kontrol fareler (n = 76); Ön-HU: HU (n = 54) öncesinde tüm fareler; HU14: 14 gün (n = 34) fareler hindlimb boşaltılır; HU28: fareler hindlimb boşaltılır 3 gün (n = 22) 28 gün (n = 20); REC: kafes izin hindlimb boş fareler kurtarabilirsiniz. Vücut ağırlığı gruplar arasında anlamlı bir fark gözlendi. Şekil 2 soleus kas atrofi (± SD). Kısaltmalar: CON: ağırlık taşıyan kontrol fareler (n = 76); HU14: 14 gün (n = 34) fareler hindlimb boşaltılır; HU28: 28 gün (n = 20) fareler hindlimb boşaltılır ve REC: izin hindlimb boş fareler 3 gün (n = 22) kurtarmak için kafes. * Ağırlık taşıyan kontrolü (CON) göre önemli derecede farklılık gösteriyor (p <0,001). HÜ grupları hem de daha δSignificantly farklı (p <0.01). 467fig3.jpg "alt =" Şekil 3 "/> Şekil 3. Gıda Tüketimi (Ortalama ± SD). Ağırlık taşıma ve hindlimb boşaltma sırasında ortalama günlük gıda alımı (g / gün). Kısaltmalar: ağırlık taşıyan kontrol fareler (n = 76), HU: fareler hindlimb unloaded14 – 28 gün. CON ve HU grupları arasında anlamlı bir farklılık gözlenmedi. Şekil 4 Adrenal Kütle (± SD). Kısaltmalar: CON: ağırlık taşıyan kontrol fareler (n = 76); HU14: 14 gün (n = 34) fareler hindlimb boşaltılır; HU28: 28 gün (n = 20) fareler hindlimb boşaltılır ve REC: izin hindlimb boş fareler 3 gün (n = 22) kurtarmak için kafes. Gruplar arasında anlamlı bir fark gözlenmiştir.