Инъекция взрослых мух дрозофилы: метод соединения или доставки этикетки
Published: April 30, 2023
Abstract
Источник: Назарио-Тул, A. E., Wu, L. P. Оценка клеточного иммунного ответа плодовой мухи, Drosophila меланогастер, Использование In Vivo Phagocytosis Assay. J. Vis. Exp. (2019).
Это видео описывает, как выполнить инъекцию живых взрослых мух и включает в себя пример протокола, в котором помеченные частицы и трипан синий вводятся в мухи брюшной полости для анализа фагоцитоза.
Protocol
Этот протокол является выдержкой из Назарио-Тул и Ву, Оценка клеточной иммунной реакции плодовой мухи, Drosophila меланогастер, Использование In Vivo Phagocytosis Assay, J. Vis. Exp. (2019). 1. Подготовка частиц флуорессейна для инъекций Восстановить 10 мг коммерчески доступны?…
Materials
| 5430-10 PicoNozzle Kit | World Precision Instruments | 5430-10 | Holder for 1.0mm pipette |
| E. coli (K-12 Strain) BioParticles, Fluorescein conjugate | Invitrogen | E2861 | Killed E. coli labeled with FITC (Fluorescein). Use to test phagocyte recogntion and uptake of gram-negative bacteria. (~494/~518 nm) |
| Needle Pipette Puller | David Kopf Instruments | Model 725 | |
| Pneumatic PicoPump PV820 | World Precision Instruments | SYS-PV820 | The World Precision Instruments Pneumatic PicoPump PV820 uses differential pressures to hold liquid in the glass needle between injections. The user manually controls short bursts of gas pressure to expel the liquid – allowing delivery of sub-nanoliter volumes. The amount of liquid delivered depends on two main variables – the size of the glass needle opening and the amount of time injection pressure is applied. set the instrument to 100 ms "TIMED" mode. |
| Thin Wall Glass Capillaries | World Precision Instruments | TW100F-3 | Needles for injection. OD = 1.0 mm |
| Trypan Blue Solution (0.4%) | Sigma | T8154 | Used to quench extracellular fluorescence of Fluorescein, Alexa Fluor, or Texas Red labeled particles. |
Cite This Article
Injection of Adult Drosophila Flies: A Method of Compound or Label Delivery. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20113, doi: (2023).