Injektion von adulten Drosophila Fliegen: Eine Methode der Verbindung oder Etikettenlieferung
Published: April 30, 2023
Abstract
Quelle: Nazario-Toole, A. E., Wu, L. P. Assessing the Cellular Immune Response of the Fruit Fly, Drosophila melanogaster, Using an In Vivo Phagocytosis Assay. J. Vis. (2019).
Dieses Video beschreibt, wie man eine Injektion von lebenden erwachsenen Fliegen durchführt und enthält ein Beispielprotokoll, in dem beschriftete Partikel und Trypanblau in Fliegenabdomen injiziert werden, um Phagozytose zu assay.
Protocol
Dieses Protokoll ist ein Auszug aus Nazario-Toole und Wu, Assessing the Cellular Immune Response of the Fruit Fly, Drosophila melanogaster, Using an In Vivo Phagocytosis Assay, J. Vis. Exp. (2019). 1. Vorbereiten von Fluorescein-Partikeln für die Injektion Rekonstituieren Sie 10 mg kommerziell erhältliche, wärmeabgetötete Bakterienpartikel, die mit Fluorescein (siehe Materialtabelle)gekennzeichnet sind, auf eine Lagerkonzentration von 1…
Materials
| 5430-10 PicoNozzle Kit | World Precision Instruments | 5430-10 | Holder for 1.0mm pipette |
| E. coli (K-12 Strain) BioParticles, Fluorescein conjugate | Invitrogen | E2861 | Killed E. coli labeled with FITC (Fluorescein). Use to test phagocyte recogntion and uptake of gram-negative bacteria. (~494/~518 nm) |
| Needle Pipette Puller | David Kopf Instruments | Model 725 | |
| Pneumatic PicoPump PV820 | World Precision Instruments | SYS-PV820 | The World Precision Instruments Pneumatic PicoPump PV820 uses differential pressures to hold liquid in the glass needle between injections. The user manually controls short bursts of gas pressure to expel the liquid – allowing delivery of sub-nanoliter volumes. The amount of liquid delivered depends on two main variables – the size of the glass needle opening and the amount of time injection pressure is applied. set the instrument to 100 ms "TIMED" mode. |
| Thin Wall Glass Capillaries | World Precision Instruments | TW100F-3 | Needles for injection. OD = 1.0 mm |
| Trypan Blue Solution (0.4%) | Sigma | T8154 | Used to quench extracellular fluorescence of Fluorescein, Alexa Fluor, or Texas Red labeled particles. |
Cite This Article
Injection of Adult Drosophila Flies: A Method of Compound or Label Delivery. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20113, doi: (2023).