成人 ショウジョウバエ の注射:化合物または標識の送達方法
Published: April 30, 2023
Abstract
出典:ナザリオ・ツール、A.E.、呉、L.P. フルーツフライの細胞性免疫応答を評価し、 ショウジョウバエメラノガスター、インビボファゴサイトーシスアッセイを使用して。 J. ヴィス・エクス (2019).
このビデオでは、生きた成体ハエの注入を行う方法を説明し、標識粒子とトリパンブルーをフライ腹部に注入して食細胞節をアッセイするプロトコルの例を示します。
Protocol
このプロトコルは、ナザリオ・ツールとウーからの抜粋であり、フルーツフライの細胞性免疫応答を評価し、ショウジョウバエメラノガスター、インビボファゴサイトシスアッセイを使用して、J.Vis.Exp.(2019)。 1. フッ素粒子の注射準備 市販の10mgの熱死菌粒子を、990μL無菌1x PBSおよび10μL50 mMのアジドナトリウムを添加して10mg/mLのストック濃度?…
Materials
| 5430-10 PicoNozzle Kit | World Precision Instruments | 5430-10 | Holder for 1.0mm pipette |
| E. coli (K-12 Strain) BioParticles, Fluorescein conjugate | Invitrogen | E2861 | Killed E. coli labeled with FITC (Fluorescein). Use to test phagocyte recogntion and uptake of gram-negative bacteria. (~494/~518 nm) |
| Needle Pipette Puller | David Kopf Instruments | Model 725 | |
| Pneumatic PicoPump PV820 | World Precision Instruments | SYS-PV820 | The World Precision Instruments Pneumatic PicoPump PV820 uses differential pressures to hold liquid in the glass needle between injections. The user manually controls short bursts of gas pressure to expel the liquid – allowing delivery of sub-nanoliter volumes. The amount of liquid delivered depends on two main variables – the size of the glass needle opening and the amount of time injection pressure is applied. set the instrument to 100 ms "TIMED" mode. |
| Thin Wall Glass Capillaries | World Precision Instruments | TW100F-3 | Needles for injection. OD = 1.0 mm |
| Trypan Blue Solution (0.4%) | Sigma | T8154 | Used to quench extracellular fluorescence of Fluorescein, Alexa Fluor, or Texas Red labeled particles. |
Cite This Article
Injection of Adult Drosophila Flies: A Method of Compound or Label Delivery. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20113, doi: (2023).