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Reconstituição de Nucleosomes com Histones irmã diferencialmente Isotope-rotulados
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Capítulos
- 00:05Título
- 01:03Reconstitution of a Histone Octamer with Differentially Isotope-labeled and Asymmetrically-modified Histone H3
- 03:20Tandem Affinity Purification of Reconstituted Octamer
- 05:28Nucleosome Reconstitution
- 07:07Results: Generation of Differentially Isotope-labeled Nucleosomes for Investigating Cross-talk Mechanisms
- 08:58Conclusion
Este protocolo descreve a reconstituição de nucleossomas contendo histonas irmã isotopicamente marcados diferencialmente. Ao mesmo tempo, nucleossomas assimetricamente pós-translacionalmente modificados pode ser gerado após o uso de uma cópia da histona premodified. Estas preparações podem ser prontamente usadas para estudar os mecanismos de modificação de diafonia, simultaneamente em ambas as histonas irmã, utilizando espectroscopia de RMN de alta resolução.
