É necessária uma assinatura da JoVE para visualizar este conteúdo. Faça login ou comece sua avaliação gratuita.
Capítulos
- 00:05Título
- 01:03Reconstitution of a Histone Octamer with Differentially Isotope-labeled and Asymmetrically-modified Histone H3
- 03:20Tandem Affinity Purification of Reconstituted Octamer
- 05:28Nucleosome Reconstitution
- 07:07Results: Generation of Differentially Isotope-labeled Nucleosomes for Investigating Cross-talk Mechanisms
- 08:58Conclusion
Этот протокол описывает воссоздание нуклеосом, содержащих дифференцированно меченого изотопом сестра гистоны. В то же время, асимметрично посттрансляционно модифицированные нуклеосом могут быть получены после того, как с помощью premodified гистонов копии. Эти препараты могут быть легко использованы для изучения механизмов изменения перекрестных помех, одновременно на обеих сестринских гистонов, с помощью высокого разрешения ЯМР-спектроскопии.
