Medição espacial da pressão do fluido intersticial do tumor: um método para medir a pressão do fluido intersticial

Pressão de fluido intersticial ou IFP é a força exercida pelo fluido nos espaços entre as células em um tecido. Primeiro, anestesiar um camundongo portador de tumor com isofluorano de 2% misturado com oxigênio e imobilizá-lo na tomografia computadorizada ou plataforma robô CT-IFP. Agora, injete na veia traseira lateral de um rato com lipossomos encapsulados com um agente de contraste para visualizar o tumor. Devolva o animal para sua gaiola e deixe-o se recuperar.

Entre 48 a 72 horas após a injeção, fixe o mouse anestesiado na plataforma CT-IFP e selecione algumas posições espaçadas uniformemente no tumor para medir o IFP. Em seguida, lave a agulha do sistema IFP com uma solução salina de heparina antes da inserção. Coloque a agulha na posição selecionada e insira-a dentro do tecido tumoral.

Agora, adquira imagens em todas as posições e meça o IFP usando o software. O IFP no tumor é geralmente alto devido à sua natureza densa, vasos sanguíneos anormais e sistema linfático defeituoso. Isso pode levar ao acúmulo de lipossomos na periferia do tumor. No protocolo a seguir, demonstraremos a técnica para medir o IFP em um tumor sólido.

Para medir o IFP, fita o animal na plataforma robô CT-IFP, de tal forma que o tumor seja imobilizado e acessível ao sistema robô CT-IFP. Obtenha uma micro tomografia anatômica como acabou de demonstrar, em seguida, carregue os dados de inserção pré-predle no software de alinhamento do robô CT-IFP e ajuste a janela e o nível para visualizar o tumor. Clique na borda do tumor em qualquer imagem, seguida pela seleção de um segundo local de aro no lado adjacente do tumor.

O software calculará uma série de posições ao longo de uma linha linear entre os dois pontos. Em seguida, selecione as coordenadas x, y e z para uma série de cinco a oito posições espaçadas uniformemente da lista. Em seguida, lave a agulha do sistema IFP com uma solução de heparina salina e insira as primeiras posições de agulha pré-determinadas nas janelas coordenadas XYZ do software de controle robô CT-IFP.

Pressione o botão Ir para mover o robô para o local desejado. Em seguida, para cada posição da agulha, clique no botão Inserir agulha para inserir a agulha no tecido. Aperte e libere a tubulação PE-20 para confirmar uma boa comunicação de fluido entre a agulha IFP e o tecido e observe que a medição ifp aumenta e retorna ao valor pré-beliscando no software de aquisição IFP. Por fim, adquira uma tomografia computadorizada anatômica com a agulha inserida, clicando no botão Retract Needle no final da varredura para remover a agulha do tecido.