Encyclopedia of Experiments: Cancer Research
É necessário ter uma assinatura JoVE para assistir este Faça login ou comece sua avaliação gratuita.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
לחץ נוזל ביניים או IFP הוא הכוח המופעל על ידי הנוזל בחללים בין התאים ברקמה. ראשית, יש להרדים עכבר נושא גידול עם 2% איזופלואורן מעורבב עם חמצן ולשתק אותו בפלטפורמת טומוגרפיה ממוחשבת או רובוט CT-IFP. עכשיו, להזריק בווריד הזנב לרוחב של עכבר עם ליפוזומים עטופים עם סוכן ניגוד לדמיין את הגידול. להחזיר את החיה לכלוב שלה ולתת לו להתאושש.
בין 48 ל 72 שעות לאחר ההזרקה, לאבטח את העכבר המרדים על פלטפורמת CT-IFP ובחר כמה עמדות במרווחים שווים על הגידול למדידת IFP. לאחר מכן, לשטוף את מחט מערכת IFP עם תמיסת מלח הפרין לפני הכניסה. מביאים את המחט על התנוחה שנבחרה ומכניסים אותה לתוך רקמת הגידול.
כעת לרכוש תמונות בכל העמדות ולמדוד את IFP באמצעות התוכנה. IFP בגידול הוא בדרך כלל גבוה בשל אופיו הצפוף, כלי דם חריגים, ומערכת הלימפה פגומה. זה עלול להוביל להצטברות של ליפוזומים בפריפריה הגידול. בפרוטוקול הבא, נדגים את הטכניקה למדידת ה- IFP בגידול מוצק.
כדי למדוד את ה- IFP, הדבק את החיה בפלטפורמת הרובוט CT-IFP, כך שהגידול משותק ונגיש למערכת הרובוטים CT-IFP. השג סריקת מיקרו CT אנטומית כפי שהוכח זה עתה, ולאחר מכן טען את נתוני החדרת preneedle לתוכנת היישור הרובוטית CT-IFP והתאם את החלון והרמה כדי לדמיין את הגידול. לחץ על שפת הגידול בכל תמונה, ואחריו הבחירה של מיקום שפה שנייה בצד הסמוך של הגידול.
התוכנה תחשב סדרה של מיקומים לאורך קו ליניארי בין שתי הנקודות. לאחר מכן בחר את קואורדינטות x, y ו- z עבור סידרה של חמישה עד שמונה מיקומים המרווחים באופן שווה מהרשימה. לאחר מכן לשטוף את מחט מערכת IFP עם תמיסת הפרין מלוחים ולהזן את עמדות המחט שנקבעו מראש הראשון לתוך חלונות קואורדינטות XYZ של תוכנת בקרת הרובוט CT-IFP.
לחץ על לחצן עבור כדי להעביר את הרובוט למיקום הרצוי. לאחר מכן עבור כל מיקום מחט בתורו, לחץ על כפתור הכנס מחט כדי להכניס את המחט לתוך הרקמה. צבוט ושחרר את צינורות PE-20 כדי לאשר תקשורת נוזלית טובה בין מחט ה- IFP לרקמה ולבחון שמדידת ה- IFP עולה וחוזרת לערך הצביטה מראש בתוכנת רכישת IFP. לבסוף, לרכוש סריקת CT אנטומית עם המחט מוכנס, לחיצה על כפתור מחט חזרה בסוף הסריקה כדי להסיר את המחט מן הרקמה.
