Räumliche Messung des interstitiellen Fluiddrucks des Tumors: Eine Methode zur Messung des interstitiellen Flüssigkeitsdrucks

Interstitielle Flüssigkeitsdruck oder IFP ist die Kraft, die von der Flüssigkeit in den Räumen zwischen den Zellen in einem Gewebe ausgeübt wird. Zuerst befeuchten Sie eine tumortragende Maus mit 2% Isofluoran, die mit Sauerstoff vermischt wird, und immobilisieren Sie sie auf der Computertomographie oder CT-IFP-Roboterplattform. Nun, injizieren in die seitliche Schwanzvene einer Maus mit Liposomen mit einem Kontrastmittel verkapselt, um den Tumor zu visualisieren. Bringen Sie das Tier in seinen Käfig zurück und lassen Sie es sich erholen.

Zwischen 48 und 72 Stunden nach der Injektion, sichern Sie die anästhesierte Maus auf der CT-IFP-Plattform und wählen Sie ein paar gleichmäßig verteilte Positionen auf dem Tumor für die Messung des IFP. Als nächstes spülen Sie die IFP-Systemnadel vor dem Einsetzen mit einer Heparin-Saline-Lösung. Bringen Sie die Nadel an die ausgewählte Position und legen Sie sie in das Tumorgewebe ein.

Erfassen Sie nun Bilder an allen Positionen und messen Sie das IFP mit der Software. Das IFP im Tumor ist in der Regel hoch aufgrund seiner dichten Natur, abnormale Blutgefäße, und defekte Lymphsystem. Dies kann zur Ansammlung von Liposomen in der Tumorperipherie führen. Im folgenden Protokoll zeigen wir die Technik zur Messung des IFP in einem soliden Tumor.

Um das IFP zu messen, kleben Sie das Tier auf der CT-IFP Roboterplattform, so dass der Tumor immobilisiert und für das CT-IFP-Robotersystem zugänglich ist. Erhalten Sie einen anatomischen Mikro-CT-Scan, wie gerade gezeigt, dann laden Sie die Preneedle-Einfügedaten in die CT-IFP-Roboterausrichtungssoftware und passen Sie das Fenster und den Pegel an, um den Tumor zu visualisieren. Klicken Sie auf den Rand des Tumors in jedem Bild, gefolgt von der Auswahl einer zweiten Felgenposition auf der angrenzenden Seite des Tumors.

Die Software berechnet eine Reihe von Positionen entlang einer linearen Linie zwischen den beiden Punkten. Wählen Sie dann die x-, y- und z-Koordinaten für eine Reihe von fünf bis acht gleichmäßig verteilten Positionen aus der Liste aus. Als nächstes spülen Sie die IFP-Systemnadel mit einer saline heparin Lösung und geben Sie die ersten vorgegebenen Nadelpositionen in die XYZ-Koordinatenfenster der Robotersteuerungssoftware CT-IFP ein.

Drücken Sie die Go-Taste, um den Roboter an die gewünschte Position zu bewegen. Klicken Sie dann für jede Nadelposition nacheinander auf die Schaltfläche Nadel einfügen, um die Nadel in das Gewebe einzufügen. Pinch und release die PE-20 Schläuche, um eine gute Flüssigkeitskommunikation zwischen der IFP-Nadel und dem Gewebe zu bestätigen und zu beobachten, dass die IFP-Messung erhöht und kehrt zum Pre-Pinching-Wert auf der IFP-Erfassungssoftware zurück. Schließlich erhalten Sie einen anatomischen CT-Scan mit eingelegter Nadel, indem Sie auf die Taste Nadel zurückziehen am Ende des Scans klicken, um die Nadel aus dem Gewebe zu entfernen.