Удобный метод для извлечения и анализа с высокого давления жидкостной хроматографии и их метаболитов катехоламинов нейротрансмиттеров

Медиаторы катехоламинов и их содержание метаболитов в жидкостях организма может повлиять на нервные функции и влияют на баланс ответ на стимул государств в значительной степени¹. Аномалии может вызвать целый ряд заболеваний, таких как pheochromacytoma, ganglioneuroma, нейробластомы и неврологических расстройств^1,2. Добыча и определения катехоламинов в жидкостях организма имеет смысл для диагностики соответствующих заболеваний. Однако катехоламинов в биологических образцах существует в низких концентрациях и легко окисляются. Кроме того они являются очень трудно элюировать вследствие большого объема вмешательства в средний³. Таким образом одновременное выявление катехоламинов в биологических жидкостях по-прежнему является проблемой.

Там были показаны что мочевых катехоламинов может быть мерой стресса, и что их уровни важных биологических маркеров, отвечая на тактильной стимуляции обработки новорожденных⁵отзывов. Согласно исследованиям все дети, которые страдают от преждевременной инцидентов подвергаются риску для мозга травмы^4,5,6, и травмы может привести к ненормальной выпуска катехоламинов и связанные с этим вопросы в жидкости. Существуют расширенные магнитного резонанса методы, которые может обнаружить повреждение мозга в ранних фазах^7,8. Однако в течение первых 48 часов, Аномальные нервной процесс приведет к постоянной мозговой травмой, что будет очевидным в медицинских изображений¹¹. Кроме того инструмент высокая стоимость и ограниченные ресурсы, наряду с другими факторами, делает невозможным для всех отделениях неонатологии иметь доступ к эти специализированные методы нейро изображений. Однако использование легко доступным и практических биомаркеров (например катехоламинов и их метаболитов) может преодолеть эти недостатки, и показ биомаркера в жидкостей человека могут помочь в ранней диагностике черепно-мозговой травмы и привести к запрос Идентификация новорожденных нуждающихся нейропротекции⁹. Катехоламинов в моче может быть простой и очевидной индекса, из-за прямой корреляции между количество из них выпущены в жидкости и neuroactivity функции.

Среди биологических жидкостях, спинномозговой жидкости (CSF) и образцы плазмы не легко получить через существующие травматических процедуры, и это также очень трудно избавиться от вмешательства из-за клея белков и других примесей, ведущих к хлопотно и процесс времени выборки, который подходит для повторного обнаружения. Кроме того для детей, это практически невозможно получить образцы в травматических моды. Таким образом, мочеполовых выборки лучше, чем другие формы выборки, как это неинвазивный, легко работать и может быть повторно сделано. Обильные и легко хранить и показать большие преимущества над другими формами биологических образцов мочи.

Основные методы для количественного определения катехоламинов в биологических жидкостях включают radioenzymic анализов¹⁰, энзим соединенный иммунной сорбент анализов¹¹,¹² вольтамперометрии и тепловой линзы спектрометрии¹³. Но недостатки существуют, такие сложные операции и трудно обнаружить несколько целей. Сегодня техника доминирующей анализа является высокой производительности жидкостной хроматографии (ВЭЖХ)¹⁴, в сочетании с чувствительной электрохимических¹⁵ или Флуориметрическое обнаружения¹⁶, из-за его высокой чувствительностью и хорошей селективности. С технологией тандем масс-спектрометрии, например жидкостной хроматографии/масс-спектрометрия (LC/МС) и жидких хроматография/масс спектрометрии/масс-спектрометрии (LC/МС/МС), анализ и количественной оценки нейротрансмиттеров можно достичь высокого точности и конкретности^17,18. Однако MS техника требует дорогостоящей аппаратуры, а также существенно квалифицированной рабочей силы, делая метод трудно применять повсеместно в большинстве обычных лабораторий. ВЭЖХ-ECD систем обычно есть в самых обычных и клинических лабораториях и таким образом стать общей и хороший выбор для исследовательских групп для определения химических, но они требуют образца введены в систему, чтобы быть чистым и из микромасштабной объем¹⁹. Таким образом она имеет большое значение для очищения и уплотняют образца до анализа. Классический метод для очистки шаг — экстракции жидкости жидкостью^14,,1520 и off-line твердофазный добычи, включая активированные глинозема столбец^21,22 и diphenylborate (DPBA) комплексообразованию^23,24,25,26.

Myeongho ли и др. использую полимерной смолы, химически модифицированных Корона эфира как адсорбент выборочно извлекать катехоламинов из мочи человека начиная с 2007 года²⁷. Кроме того, в 2006 году он Haibo и др. продемонстрировал снисходительный синтеза подход для boronate сходства извлечения сорбент byutilizing композита на основе nanomagnetic functionalizable nanomagnetic олигомерных полиэдральных силсесквиоксанов (ПОСС) и применяя его к обогащению катехоламинов в мочи человека (норадреналина, адреналина и изопреналин)²⁸. Они также воспользовались наноматериалов для выполнения работы, используя технологию под названием нано electrospinning и формирования полимерных волокнистых материалов в пределах нанометровых размеров элементов. Процесс electrospinning можно настроить диаметр, морфология и пространственной выравнивание продукта, управляя рабочее напряжение и изменения содержания спиннинг решения наряду с другими параметрами²⁹. По сравнению с обычными картриджа SPE, electrospun nanofibers хорошо подходит для извлечения и обогатить целевой аналитов с сложной матрицы, как они оборудованы с высоким соотношением площадь поверхности и объем адсорбировать аналитов с высокой эффективностью, и проявляют более легко контролировать химических свойств поверхности, позволяет удобно прикрепление целевых соединений. Эти свойства делают их хорошим выбором для SPE адсорбентов, значительно снижает твердой фазы и десорбции растворителей сумма^30,31,,32–³³. Для катехоламинов в образцах мочи electrospun нановолокон, состоящий из apolymeric короны эфира с полистирола (PCE-PS) были использованы выборочно извлекать три катехоламинов (“NE”, “E” и “Да”)³⁴. В документе отмечается, селективный эфира Корона адсорбированные целей NE, E и да, которая была основана на ее правильной геометрии для привязки катехоламинов через формирование водородных связей. Результаты отображаются материала эфира Корона эффективно, удаление других мешающих соединений, содержащихся в биологических образцах. Вдохновленный настоящего доклада, Роман был разработан метод для селективного извлечения катехоламинов с использованием electrospun композитный нановолокон, состоящий из PCE-ПС

В этом документе метод сообщалось ранее³⁴ была улучшена и работают не только для анализа успешно E, NE и да, но и их метаболитов, MHPG и DOPAC, в моче. Мы также исследовать новые возможности для механизма процесса адсорбции. Метод показывает удовлетворяющих эффективности добычи и избирательности для пяти аналитов, и этот метод был проверен в анализе мочи от риска младенцев с перинатальной повреждения головного мозга и здорового контроля.