小鼠多巴胺能神经元的原代培养

多巴胺，基本脑神经递质^1,2中的一个，主要是释放由脑多巴胺能（DA）神经元。大多数DA能神经元位于中脑^2-6的腹侧部分。概略地，中脑多巴胺神经元可在三个解剖和功能划分不同的投影系统：mesostriatal，中脑边缘和mesocortical通路^2,5。黑质纹状体通路参与运动行为，中脑边缘通路在加强，动机和学习中发挥重要作用，而多巴胺能途径投射到额叶前部皮质有牵连的认知^2。

多巴胺神经元参与了几个人的神经系统疾病如精神分裂症，注意力不足，过度活动症和帕金森氏病^{（PD）2,4。}帕金森病的特点是DA能神经元的进行性和选择性变性连接黑质致密部（SNC）的纹状体。的黑质-纹状体多巴胺神经元的结果在纹状体严重多巴胺耗竭的损失，是负责对帕金森病的运动症状（运动迟缓，静止性震颤，和刚性^）7。的特发性帕金森病的初始原因尚未确定与当前治疗是唯一的症状，目的是恢复的多巴胺水平在纹状体。最常用的处方药物是左旋多巴（左旋多巴），多巴胺的前体自然。尽管左旋多巴的给药补偿多巴胺在一定时间内的损耗，运动并发症后发生的长期治疗（运动障碍和开/关状态^）8,9。

研究多巴胺能神经元和PD是在不断发展和正在作出巨大努力来开发基于细胞移植，基因治疗，或神经保护剂^10,11治疗。然而，一个重要问题仍然是非阐明：什么是极端vulnerab的原因DA能神经元的能性？部分答案可以在DA能神经元的活性被发现。在DA能神经元的兴奋性电活动和减速似乎增加他们的倾向退化^12。然而，帕金森病发病机制的复杂性，需要进一步研究，以确定神经元变性^13-15参与多巴胺的机制。

小学文化，特别是有关研究多巴胺神经元的特性^16-19和对神经保护剂^20-24评估挑战这些神经元的各种压力。大鼠培养模型是最常用的，如大鼠胚胎中脑的解剖比较容易，比较用鼠标，以及较高量的神经元可以在大鼠中获得。然而，新一代的²⁵病转基因小鼠模型大大提高了社区的神经学家小学文化，从鼠标^26-29的兴趣。虽然文化公关从新生动物epared都可以使用，最好是它们的胚胎在有丝分裂后的阶段（E13.5的中脑的神经元）制备，当神经元都保留其分化能力。以下协议呈现在来自小鼠胚胎（E13.5），这是最困难的，制备原代培养物分离的脑的神经元。值得注意的是，我们提供了使用无血清培养基更好的重现性的协议。在培养制备物（夹层和机械解离）的两个最重要的步骤将被仔细地详述于相关联的视频。