ويمكن قياس ردود الكهربية للخلايا العصبية الحسية الشمية إلى odorants في الحشرات باستخدام التسجيلات sensillum واحد. في هذه المقالة سوف نقوم الفيديو لشرح كيفية تنفيذ تسجيلات sensillum واحدة في هوائيات على ذبابة الخل (<em> ذبابة الفاكهة السوداء البطن</em>) والفك العلوي palps البعوض الذي ينقل الملاريا (<em> الأنوفيلة الغامبية</em>).
حاسة الشم أمر أساسي للحشرات للعثور على الأطعمة ، والاصحاب ، الحيوانات المفترسة ، ومواقع oviposition 3. يتم تضمين الخلايا العصبية الحسية الشمية الحشرات (OSNs) في الشعر الحسية ودعا sensilla ، التي تغطي سطح أجهزة الشمية. وتغطي سطح كل sensillum مع مسام صغيرة ، يمكن من خلالها تمرير odorants وتذوب في السائل دعا الليمفاوية sensillum الذي يغمر التشعبات الحسية من OSNs يضم في sensillum معين. وأعرب عن التشعبات OSN مستقبلات الرائحة (OR) والبروتينات ، والتي تؤدي وظيفة والحشرات في قنوات ايون رائحة بوابات 4 و 5. تفاعل مع نسب الأرجحية odorants إما زيادة أو نقصان معدل اطلاق القاعدية من OSN. هذا نشاط الخلايا العصبية في شكل امكانات العمل يجسد التمثيل الأولى من الجودة ، والكثافة ، والخصائص الزمنية للالرائحة 6 ، 7.
نظرا لسهولة الوصول إلى هذه الشعرات الحسية ، فمن الممكن أن تؤدي التسجيلات من خارج الخلية OSNs واحد عن طريق إدخال القطب تسجيل في sensillum الليمفاوية ، في حين يوضع القطب المرجع في الليمفاوية من العين أو جسم الحشرة. في ذبابة الفاكهة ، sensilla منزل ما بين واحد وأربعة OSNs ، ولكن كل OSN يعرض عادة على ارتفاع السعة مميزة. تقنيات الفرز ارتفاع تجعل من الممكن لتعيين الاستجابات التشويك لOSNs الفردية. هذا التسجيل sensillum واحد (SSR) تقنية مراقبة الفرق في محتملة بين الليمفاوية sensillum والمرجعية باعتبارها القطب التموج الكهربائية التي تتولد عن هذا النشاط على مستقبلات OSNs 1 ، 2 ، 8. تغييرات في عدد من المسامير ردا على الرائحة تمثل الأساس الخلوي للرائحة الترميز في الحشرات. هنا ، نحن تصف طريقة إعداد المستخدمة حاليا في المختبر لإجراء إصلاح قطاع الأمن في melanogaster ذبابة الفاكهة والأنوفيلة الغامبية ، وتظهر آثار الناجمة عن ممثل odorants بطريقة sensillum محددة.
تستخدم إشارات شمية بواسطة الكائنات الحية لتحديد مصادر الغذاء والاصحاب المحتملة ، والحيوانات المفترسة. الخلايا العصبية الحسية الشمية (OSNs) هي المركز الأول بين التتابع مؤثرات الخارجية وأعلى المراكز في الدماغ حيث يتم معالجة المزيد من المعلومات. في melanogaster ذبابة الفاك…
Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
---|---|---|---|---|
Paraffin oil | Odors | Fluka | 76235 | |
High purity odors (>98%) | Odors | Sigma-Aldrich | Methyl acetate #296996 1-octen-3-ol #74950 |
|
Filter paper strips | Odors | Fisherbrand | 05-714-1 | Chromatography paper |
Connectors | Odors | Cole-Parmer | EW-06365-40 | 1/16×1/8″ |
Glass vials | Odors | Agilent Technologies | 5182-0556 | |
Air line plastic tubing | Odor Delivery | Python Products | 500PAL | |
1 serological pipette | Odor Delivery | Corning | 4101 | 10 mL |
Plastic tubing | Odor Delivery | Cole-Parmer | EW-06418-0 | 0.050″x0.090″OD |
Disposable borosilicate glass Pasteur pipettes | Odor Delivery | FisherBrand | 13-678-20A | 5-3/4 inches |
Programmable stimulus controller | Odor Delivery | Syntech | CS-55 | |
Anti-vibration table | Electrophysiology Equipment | TMC | 63533 | 36”Wx30”Dx29”H |
Faraday cage | Electrophysiology Equipment | TMC | MI8133303 | |
Inverted microscope | Electrophysiology Equipment | Nikon | E600FN ECLIPSE | Recording microscope |
10x and 100x objectives | Electrophysiology Equipment | Nikon | 10x Plan Fluor 100x L Plan | |
Dissecting microscope | Electrophysiology Equipment | Nikon | EZ645 | electrode sharpening/insect prep microscope |
Magnetic stands | Electrophysiology Equipment | Newport | MODEL 150 | |
IDAC | Electrophysiology Equipment | Syntech | IDAC-4 | |
Acquisition software | Electrophysiology Equipment | Syntech | Autospike | |
1 macromanipulator | Electrophysiology Equipment | NARISHIGE | MN-151 | Joystick manipulator Used for positioning reference electrode |
1 micromanipulator | Electrophysiology Equipment | EXFO | PCS-6000 | Used for positioning recording electrode |
Crocodile clip | Electrophysiology Equipment | Pomona | AL-B-12-0 | |
Electric cable | Electrophysiology Equipment | Pomona | B-36-0 | Test Cable Assembly |
2 electrode holders | Electrophysiology Equipment | Syntech | N/A | Electrode holders (set of 2) for tungsten wire electrode |
AC probe | Electrophysiology Equipment | Syntech | N/A | Universal single ended probe (10xAC) |
Tungsten electrodes | Electrophysiology Equipment | Microprobes | M210 | straight tungsten rods, 0.005“x3“ |
Potassium hydroxide | Electrophysiology Equipment | Sigma-Aldrich | 221473 | |
Syringe | Electrophysiology Equipment | BD | 301625 | 20 mL |
Power supply | Electrophysiology Equipment | WILD HEERBRUGG 6V 40W | e.g MTR32 | |
Vertical puller | Insect prep | Narishige | PB-7 | |
Razor blade | Insect prep | VWR | 55411-050 | |
Dental wax | Insect prep | Patterson | 091-1503 | |
Microscope slide | Insect prep | FisherBrand | 12-550A | |
Cover glass | Insect prep | FisherBrand | 12-541A | 18X18 #1.5 |
Polypropylene mesh | Insect prep | Small Parts inc. | CMP-0500-B | |
Glass electrode | Insect prep | Frederick Haer & Co. | 27-32-0-075 | Capillary tubing borosilicate 1.5mm OD x 1.12mm ID x 75 mm |
Double-sided tape (3M) | Insect prep | 3M | MMM6652P3436 | Double-sided tape (3M) |
Forceps | Insect prep | Fine Science Tools | 021×0053 | Dumont #5 Mirror Finish Forceps |
Small plastic cup | Insect prep | VWR | 89009-662 | 7 x 5.7 (23/4 x 21/4) |
Electric aspirator | Insect prep | Gempler’s | RHM200 |