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Ensayo pulldown junto con coexpresión en células bacterianas como una herramienta eficiente en el tiempo para probar interacciones desafiantes proteína-proteína
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JoVE 신문 생화학
Pulldown Assay Coupled with Co-Expression in Bacteria Cells as a Time-Efficient Tool for Testing Challenging Protein-Protein Interactions
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Ensayo pulldown junto con coexpresión en células bacterianas como una herramienta eficiente en el tiempo para probar interacciones desafiantes proteína-proteína

DOI:
10.3791/64541-v

•

07:03 min

•

December 23, 2022

•

, , , ,
1Department of the Control of Genetic Processes, Institute of Gene Biology,Russian Academy of Sciences, 2Center for Precision Genome Editing and Genetic Technologies for Biomedicine, Institute of Gene Biology,Russian Academy of Sciences

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:56Co-Transformation of Escherichia coli
  • 02:18Expression
  • 03:21Pulldown Assay
  • 04:52Results: Bacterial Co-Expression of Differentially Tagged Proteins
  • 06:15Conclusion

Summary

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Aquí, describimos un método para la coexpresión bacteriana de proteínas marcadas diferencialmente utilizando un conjunto de vectores compatibles, seguido de las técnicas convencionales de pulldown para estudiar complejos de proteínas que no pueden ensamblarse in vitro.

Tags

Pulldown AssayProtein-protein InteractionsCo-expressionHeterodimersProtein Complex AssemblyExpression OptimizationRapid ScreeningEscherichia ColiBacterial TransformationIPTG InductionCell LysisAffinity Purification

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