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Pulldown-Assay gekoppelt mit Co-Expression in Bakterienzellen als zeiteffizientes Werkzeug zum Testen anspruchsvoller Protein-Protein-Interaktionen
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JoVE 신문 생화학
Pulldown Assay Coupled with Co-Expression in Bacteria Cells as a Time-Efficient Tool for Testing Challenging Protein-Protein Interactions
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Pulldown-Assay gekoppelt mit Co-Expression in Bakterienzellen als zeiteffizientes Werkzeug zum Testen anspruchsvoller Protein-Protein-Interaktionen

DOI:
10.3791/64541-v

•

07:03 min

•

December 23, 2022

•

, , , ,
1Department of the Control of Genetic Processes, Institute of Gene Biology,Russian Academy of Sciences, 2Center for Precision Genome Editing and Genetic Technologies for Biomedicine, Institute of Gene Biology,Russian Academy of Sciences

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:56Co-Transformation of Escherichia coli
  • 02:18Expression
  • 03:21Pulldown Assay
  • 04:52Results: Bacterial Co-Expression of Differentially Tagged Proteins
  • 06:15Conclusion

Summary

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Hier beschreiben wir eine Methode zur bakteriellen Koexpression von differentiell markierten Proteinen unter Verwendung einer Reihe kompatibler Vektoren, gefolgt von den konventionellen Pulldown-Techniken zur Untersuchung von Proteinkomplexen, die sich in vitro nicht zusammensetzen können.

Tags

Pulldown AssayProtein-protein InteractionsCo-expressionHeterodimersProtein Complex AssemblyExpression OptimizationRapid ScreeningEscherichia ColiBacterial TransformationIPTG InductionCell LysisAffinity Purification

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