Journal
/
/
גנטיקה הפוכה כדי להנדס וריאנטים של נגיף RNA בעל חוש חיובי
JoVE 신문
유전학
Author Produced
JoVE 비디오를 활용하시려면 도서관을 통한 기관 구독이 필요합니다.  전체 비디오를 보시려면 로그인하거나 무료 트라이얼을 시작하세요.
JoVE 신문 유전학
Reverse Genetics to Engineer Positive-Sense RNA Virus Variants

גנטיקה הפוכה כדי להנדס וריאנטים של נגיף RNA בעל חוש חיובי

DOI:

15:49 min

June 09, 2022

, , ,

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 01:01Genome‐Wide Substitution Mutagenesis of JFH1 Using Error‐Prone PCR
  • 02:46Estimation of the Proportion of Mutations in ep‐PCR Products (Mutant Libraries)
  • 06:08Viral RNA Transfection of the Huh7.5 Cell Line
  • 07:57Quantification of Virus Titers
  • 11:59Drug‐Resistant Viral Variant Selection
  • 13:33Results: Integration of ep‐PCR and Virus Reverse Genetics to Generate HCV Mutants
  • 15:17Conclusion

Summary

자동 번역

הפרוטוקול מתאר שיטה להחדרת מגוון גנטי נשלט בגנום נגיף הפטיטיס C על ידי שילוב סינתזת RNA מוטנטית באורך מלא באמצעות PCR נוטה לשגיאות וגנטיקה הפוכה. השיטה מספקת מודל לבחירת פנוטיפ וניתן להשתמש בה עבור גנומים ארוכים של 10 קילובייט של נגיף RNA בעל חוש חיובי.

Related Videos

Read Article