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Detección de acumulación y reparación de brechas post-replicativas en células humanas utilizando el ensayo de fibra de ADN
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JoVE 신문 유전학
Detection of Post-Replicative Gaps Accumulation and Repair in Human Cells Using the DNA Fiber Assay

Detección de acumulación y reparación de brechas post-replicativas en células humanas utilizando el ensayo de fibra de ADN

DOI:

10:32 min

February 03, 2022

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Chapters

  • 00:04Introduction
  • 01:27S1 Fiber Experimental Setup
  • 03:51DNA Fiber Preparation by Spreading
  • 04:58Immunostaining of DNA Fibers
  • 06:45Image Acquisition and Analysis
  • 08:39Results: Post-Replicative ssDNA Gaps on Ongoing Forks by S1 Fiber Assay and Post-Replicative Repair by Gap Filling
  • 09:42Conclusion

Summary

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Aquí describimos dos modificaciones del ensayo de fibra de ADN para investigar las brechas de ADN de cadena simple en la replicación del ADN después de la inducción de la lesión. El ensayo de fibra S1 permite la detección de huecos post-replicativos utilizando la endonucleasa S1 específica de ssDNA, mientras que el ensayo de llenado de huecos permite la visualización y cuantificación de la reparación de huecos.

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