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Detecção de acumulação e reparo de lacunas pós-replicativas em células humanas usando o ensaio de fibra de DNA
Chapters
- 00:04Introduction
- 01:27S1 Fiber Experimental Setup
- 03:51DNA Fiber Preparation by Spreading
- 04:58Immunostaining of DNA Fibers
- 06:45Image Acquisition and Analysis
- 08:39Results: Post-Replicative ssDNA Gaps on Ongoing Forks by S1 Fiber Assay and Post-Replicative Repair by Gap Filling
- 09:42Conclusion
Aqui descrevemos duas modificações do ensaio de fibra de DNA para investigar lacunas de DNA de uma única vez na replicação do DNA após indução da lesão. O ensaio de fibra S1 permite a detecção de lacunas pós-replicativas usando a endonuclease S1 específica do SSDNA, enquanto o ensaio de preenchimento de lacunas permite visualização e quantificação do reparo de lacunas.
